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| SYBR Green I荧光RT-PCR法检测H5亚型禽流感病毒 | |
| 引用本文： | 刘丽玲,王秀荣,陈化兰,孙凯,魏萍. SYBR Green I荧光RT-PCR法检测H5亚型禽流感病毒[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2006, 0(11): 13-15 |
| 作者姓名： | 刘丽玲 王秀荣 陈化兰 孙凯 魏萍 |
| 作者单位： | 中国农业科学院 哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室，中国农业科学院 哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室，中国农业科学院 哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室，东北农业大学 动物医学学院，东北农业大学 动物医学学院 黑龙江 哈尔滨150001 东北农业大学 动物医学学院，黑龙江 哈尔滨150030，黑龙江 哈尔滨150001，黑龙江 哈尔滨150001，黑龙江 哈尔滨150030，黑龙江 哈尔滨150030 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30200201和30440009) |
| 摘 要： | 用2株不同致病力的H5亚型禽流感病毒(AIV)感染Madin-Darby canine kidney(MDCK)细胞,收集感染后6,12,24,48,72 h的病毒,提取总RNA,利用Rotor Gene RG3 000实时定量PCR仪对H5亚型AIV的HA基因进行检测,试图建立快速检测H5亚型AIV的real-time RT-PCR方法,并用所建立的方法对来自全国各地的疑似H5亚型AIV的病料和咽喉拭子、泄殖腔拭子346份进行检测。结果表明：农业部动物流感重点开放实验室建立的HA基因的teal-time RT-PCR方法可以检测到细胞培养物中和临床样品中是否含有H5亚型AIV,与常规RT-PCR比较,该方法更加特异、准确、快速。 |
| 关 键 词： | real-time RT-PCR H5亚型禽流感病毒 HA基因 |
| 文章编号： | 1004-7034(2006)11-0013-03 |
| 修稿时间： | 2006-08-16 |
Real-time RT-PCR detect H5 subtype Avain influenza virus |
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| LIU LI-ling. Real-time RT-PCR detect H5 subtype Avain influenza virus[J]. Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine, 2006, 0(11): 13-15 | |
| Authors: | LIU LI-ling |
| Affiliation: | LIU LI-ling~ |
| Abstract: | Two strains different pathogenicity H5 subtype AIV infected MDCK cells,total RNA were extracted from fluids after infected 6 h,12 h,24 h,48 h, 72 h and throat,tracheal swabs samples from chicken experimentally infected by H5 subtypes AIV,real-time RT-PCR of HA gene was done with Rotor Gene RG3000 PCR amplifier.We attempted to establish a real-time RT-PCR method to detect H5 subtype AIV.The results showed that RT-PCR method we eatablished could detect H5 subtype AIV of cell culture superoatant and swabs samples from chicken experimentally intfected.As such,the desoribed method is reliable and provides faster disease diagnostics than the conventional RT-PCR procedure to detect AIV. |
| Keywords: | Real-time RT-PCR H5 subtype A(?)V HA gene |
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