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福建柏总DNA的快速简便提取和鉴定
引用本文:李晓青,叶冰莹,陈由强,朱锦懋,安平.福建柏总DNA的快速简便提取和鉴定[J].林业科学,1999,35(5):1.
作者姓名:李晓青  叶冰莹  陈由强  朱锦懋  安平
作者单位:1. 福建师范大学生物工程学院,福州350007
2. 福建省林业科学研究院,福州350012
基金项目:福建省自然科学基金!(C9810 0 13 ),福建省教委资助!(JA970 43 )
摘    要:本文介绍了福建柏Fokieniahodginsii(Dunn)HenryetThomas总DNA的提取介质组成分 ,建立了一个快速、简便且高效提取和鉴定福建柏鲜叶、干叶、种子总DNA的方法。该方法所提DNA的产率分别为 :1 5 0~ 2 5 0 μg/g鲜叶 ,1 0 0~ 1 5 0 μg/g干叶和 1 4 0~ 1 6 0 μg/g种子 ;绝大多数粗提总DNAOD2 6 0 /OD2 80 =1 .80±0 .0 2 ;提取的鲜叶、种子和单种子胚乳总DNA皆为 4 8kb,而干叶总DNA为 5 0Kb ,都适于限制性酶切和RAPD反应 ;一般实验时间为 4h。该方法既不需氯化铯梯度离心和柱层析纯化 ,也不需氯仿 :异戊醇抽提 ,粗提的总DNA样品不经RNase消化即可用于RAPD反应或经RNase消化用于限制性酶切 ,因此 ,具有高产率、高纯度、高质量和快速简便等优点。尤其是它所提取的干叶DNA ,适于限制性酶切和PCR反应 ,解决了取材上的不便。实验中还发现 :( 1 )提取DNA之前去除叶绿素与否 ,对提取福建柏总DNA无明显影响。 ( 2 )只有去除RNA的福建柏总DNA样品 ,才能被限制性内切酶完全切开。 ( 3)RAPD模板中含RNA及一定量的蛋白质 ,均不影响扩增效果。 ( 4 )同一个体的鲜叶、干叶、种子总DNA样品 ,皆可得到完全一致的扩增产物。

关 键 词:福建柏  总DNA提取  提取介质  限制性内切酶消化
修稿时间:1998-07-16

FAST AND CONVENIENT ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF TOTAL DNA IN FOKIENIA HODGINSII (DUNN) HENRY ET THOMAS
Li Xiaoqing,Ye Bingying,Chen Youqiang,Zhu Jinmao,An Ping.FAST AND CONVENIENT ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF TOTAL DNA IN FOKIENIA HODGINSII (DUNN) HENRY ET THOMAS[J].Scientia Silvae Sinicae,1999,35(5):1.
Authors:Li Xiaoqing  Ye Bingying  Chen Youqiang  Zhu Jinmao  An Ping
Abstract:
Keywords:RAPD
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