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| 纤维二糖水解酶在乳酸乳球菌中的表达 | |
| 作者姓名： | 黄凯 何启杰 陈樱 欧阳康 黄伟坚 彭昊 韦祖樟 李军 |
| 作者单位： | 1. 广西兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室;2. 广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室;3. 农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室 |
| 摘 要： | 为在乳酸乳球菌中表达纤维二糖水解酶II(CBH II)基因,对绿色木霉(T.reesei)CBH II基因序列进行密码子优化和合成,通过PCR及T4 DNA连接酶将人工合成的序列插入到表达载体pNZ8148中,获得重组质粒pNZ8148-CBH II,重组质粒经双酶切及测序鉴定正确后,将正确的重组质粒通过电击转化进入乳酸菌NZ3900感受态细胞,通过选择性抗生素氯霉素筛选阳性克隆,放大培养后使用终浓度为20 ng/mL的Nisin进行诱导表达,诱导后的菌液经SDS-PAGE鉴定,有符合预期大小的条带,说明CBH II基因在乳酸乳球菌NZ3900中表达。研究为乳酸乳球菌的改造及开发临床应用奠定基础。 |
| 关 键 词： | 纤维二糖水解酶 克隆 乳酸乳球菌 表达 |