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传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因变异及在大场杆菌中的表达
引用本文:周继勇,丁红梅,程丽琴,JIMMY KWANG. 传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因变异及在大场杆菌中的表达[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2003, 29(1): 1-9
作者姓名:周继勇  丁红梅  程丽琴  JIMMY KWANG
作者单位:1. 浙江大学,动物预防医学研究所,浙江,杭州,310029
2. Laboratory of Animal Health Biotechnology, Institute of Molecular Agrobiology, The National University of Singapore, Singapore,117604
基金项目:Funds supported by National Natural Science Foundation of China (project No.30 0 70 5 70 ),Natural ScienceFoundation of Zhejiang Province(project No.3994 11),the Science and Technology Commission of Zhejiang Province(projectNo.99110 2 0 30 )
摘    要:
核衣壳蛋白(N)是传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白之一. 以前的研究结果显示IBV-ZJ971毒株以引起腺胃肿大为特征,IBV-X和N毒株以引起肾炎为特征.为了探讨不同组织嗜性传染性支气管炎病毒N基因的变异,我们依据已发表的IBV- Beaudette 毒株N基因的序列设计和合成引物,RT-PCR扩增IBV-ZJ971、N、X和H52的核衣壳蛋白基因,并测序、分析和在E.coli中进行表达.结果显示:IBV-ZJ971、N、X和H52毒株的N基因的ORF由1230 bp组成,编码409个氨基酸.与来源于GenBank中的IBV毒株比较,IBV-ZJ971、N、X和H52与其它IBV毒株的核苷酸同源性分别是87.0-98.6%、86.6-99.7%、86.3-99.7%、87.2%-98.5%,氨基酸的同源性分别是90.0-97.8%、 90.5-98.8%、 90.0-98.8%、 91-98%.IBV-ZJ971毒株的N蛋白不同于其他IBV的独特变异是111,117, 142, 171 和 401位点上的氨基酸改变,IBV-N和X毒株的N蛋白不同与其它IBV的独特变异是46, 48, 189,190, 220, 223, 236, 237, 240, 286, 299, 301 334, 335, 336 and 351位点上的氨基酸改变.说明IBV嗜腺胃毒株(ZJ971)和嗜肾毒株(N和X)的N基因以散在的点突变为特征.将IBV-ZJ971毒株的N基因在E.coli中表达,并用western-blotting检测,发现IBV-ZJ971的N蛋白是一分子量约为45 kD的蛋白.

关 键 词:传染性支气管炎病毒  核衣壳蛋白基因  变异  表达

Variation of nucleocapsid protein gene of infectious bronchitis virus and its expression in Escherichia coli
JIMMY KWANG. Variation of nucleocapsid protein gene of infectious bronchitis virus and its expression in Escherichia coli[J]. Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences), 2003, 29(1): 1-9
Authors:JIMMY KWANG
Abstract:
Keywords:infectious bronchitis virus  nucleocapsid protein gene  variation  expression
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