卡氏住白细胞虫rDNAITS-2的PCR扩增与测序 |
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引用本文: | 李国清,薛红,朱兴全.卡氏住白细胞虫rDNAITS-2的PCR扩增与测序[J].中国农业科学,2003,36(5):573-576. |
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作者姓名: | 李国清 薛红 朱兴全 |
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作者单位: | 华南农业大学兽医学院 |
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摘 要: | 运用PCR方法扩增了卡氏住白细胞虫rDNA的ITS 2及部分 5 .8S和 2 8S序列 (ITS2 +) ,并对该序列进行了克隆和测序。采用巨型裂殖体为材料 ,并根据SaccharomycescerevisiaerDNA中的 5 .8S、2 8S保守序列所设计的通用引物ITS3、ITS4 ,进行了虫体ITS2 +的PCR扩增 ,将所扩增片段纯化后成功地克隆于 pGEM Teasy和PMD18 T载体的T T窗口。经双向自动测序显示 ,该ITS2 +片段的大小为 2 70bp ;经NCBIBlast联机检索 ,结果显示 ,所扩片段中 5 .8S序列与S .cerevisiae的 5 .8S序列有部分相同 ,而ITS 2序列为虫体所特有 ;同时经wDNA SIS软件分析 ,显示该ITS 2序列与S .cerevisiae间同源性相对较远 ,而与柔嫩艾美耳球虫间同源性相对较近 ,故而本试验中所测序列为卡氏住白细胞虫的ITS 2特有序列。
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关 键 词: | 卡氏住白细胞虫 ITS-2 PCR 克隆 测序 |
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