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罗非鱼源无乳链球菌ZQ0910转录调控因子rovS基因的克隆及表达研究
引用本文:王蓓,简纪常,鲁义善,蔡双虎,黄郁葱,汤菊芬,李桂欢,吴灶和.罗非鱼源无乳链球菌ZQ0910转录调控因子rovS基因的克隆及表达研究[J].水产学报,2013,37(4):584-592.
作者姓名:王蓓  简纪常  鲁义善  蔡双虎  黄郁葱  汤菊芬  李桂欢  吴灶和
作者单位:1. 广东海洋大学水产学院,广东湛江524025;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东湛江524025
2. 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东湛江524025;仲恺农业工程学院,广东广州 510225
基金项目:国家重点基础研究发展计划(2009CB118704);国家重点基础研究发展计划前期(2011CB111600);广东省科技计划项目(2012B020308009);2011年广东省高等院校学科建设和教学质量与教学改革工程专项
摘    要:为了对罗非鱼源无乳链球菌ZQ0910株毒力相关转录调控因子rovS进行克隆及表达研究,实验根据GenBank上登录的相关基因设计引物,采用PCR方法扩增该株细菌的rovS基因,然后将该基因定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行IPTG诱导表达.结果显示,该基因有849个碱基,编码282个氨基酸;同源基因序列比对显示,无乳链球菌ZQ0910株与无乳链球菌2603 V与ATCC13813的rovS基因的同源性最高;经IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为34 ku;用亲和层析后的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,经ELISA检测效价达到1∶512000.研究结果表明,实验成功克隆与表达了rovS基因,为深入探讨RovS调节因子在调节细菌的代谢、生长和毒力等多种生命活动中的作用提供了理论依据.

关 键 词:无乳链球菌ZQ0910  RovS转录调控因子  克隆  原核表达
收稿时间:2012/9/20 0:00:00
修稿时间:2012/11/28 0:00:00
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