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南美白对虾丝氨酸蛋白酶的分离纯化及性质研究
作者姓名:翁凌  李腾  阴利华  孙乐常  苏文金  曹敏杰
作者单位:[1]集美大学生物工程学院,福建厦门361021 [2]上海海洋大学食品学院,上海201306
基金项目:十一五国家科技支撑计划重大项目(2008BAD94B01);福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室基金项目(2008J401)
摘    要:通过硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose、Phenyl-Sepharose、Hydroxyapatite、Superdex75等方法,从南美白对虾消化腺中分离得到一种丝氨酸蛋白酶.SDS-PAGE结果显示,其分子质量约为28ku,最适pH值与最适温度分别为9.0和40℃,且pH值在7.0~10.0之间以及温度在40℃以下有较高的稳定性.底物特异性实验与抑制剂实验结果表明,该酶属于类胰蛋白酶的丝氨酸蛋白酶.动力学实验显示,以Boc-Phe-Ser-Arg-MCA为底物时,Km=0.69μmol/L,Kcat=0.33S-1,Kcat/Km=4.78×105(mol/L)-1S-1.

关 键 词:丝氨酸蛋白酶  南美白对虾  纯化  性质分析
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