| 蝉新型抗菌肽Cryptonin在毕赤酵母中的分泌表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 刘德辉,焦颖,徐蕙,吴锋,张春红,黄毓茂.蝉新型抗菌肽Cryptonin在毕赤酵母中的分泌表达及活性鉴定[J].中国兽医学报,2010,30(6). |
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| 作者姓名： | 刘德辉 焦颖 徐蕙 吴锋 张春红 黄毓茂 |
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| 作者单位： | 华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642 |
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| 摘 要： | 根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子的偏嗜性,通过SOEing法合成改造后的Cryptonin基因片段。基因克隆到pPICZα-C质粒中,获得分泌型重组酵母表达载体pPICZα-C-Cryptonin。pPICZα-C-Cryptonin通过限制性内切酶SacⅠ酶切线性化后,经电穿孔法转入毕赤酵母细胞X-33内。PCR检测Cryptonin基因与毕赤酵母染色体稳定结合,Zeocin抗性筛选,得到高拷贝转化子。在AOX(醇氧化酶)启动子调控下,Cryptonin蛋白获得分泌表达,其相对分子质量约为2700。表达产物耐热性强,在100℃条件下10min内抗菌活性不变,煮沸30min以上仍具有活性。琼脂糖孔穴扩散法检测显示表达产物对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有很好的抑菌活性。
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| 关 键 词： | 抗菌肽Cryptonin 基因设计 分泌表达 抑菌活性 |
Secreted expression of a novel cicada antimicrobial peptide cryptonin in Pichia pastoris and the detection of its activity |
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| LIU De-hui,JIAO Ying,XU Hui,WU Feng,ZHANG Chun-hong,HUANG Yu-mao.Secreted expression of a novel cicada antimicrobial peptide cryptonin in Pichia pastoris and the detection of its activity[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(6). |
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| Authors: | LIU De-hui JIAO Ying XU Hui WU Feng ZHANG Chun-hong HUANG Yu-mao |
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