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安徽乌菜DNA提取与InDel引物筛选
引用本文:马福萌,王明霞,刘童光,张其安,方凌,王本勤,刘雪静.安徽乌菜DNA提取与InDel引物筛选[J].中国瓜菜,2014(2):36-38.
作者姓名:马福萌  王明霞  刘童光  张其安  方凌  王本勤  刘雪静
作者单位:[1]安徽农业大学园艺学院,合肥230036 [2]安徽省农业科学院园艺研究所,合肥230031
基金项目:国家大宗蔬菜产业技术体系(GARS-25-G-18);安徽省蔬菜产业技术体系(皖农科[2011]6);安徽省重大科技专项(1201a0301009);安徽省农业科学院种子工程(13D0303)
摘    要:利用改良的SDS法提取了153个品种的安徽乌菜DNA,并进行2次重复,均获得了较理想的DNA产物。通过试验确定了安徽乌菜InDel-PCR的10μL最佳反应体系:1×PCR Buffer 1μL,dNTP 0.2μL,引物1μL,Taq E 0.1μL,DNA 1μL,ddH2O 6.7μL;最佳PCR扩增反应程序:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,55℃退火40 s,72℃延伸40 s,共36个循环,最后72℃延伸10 min,10℃保存。从供试的66对InDel引物中筛选出31对适合安徽乌菜、条带清晰、重复性高、多态性好的引物,为安徽乌菜品种鉴定、遗传多样性分析等奠定了基础。

关 键 词:安徽乌菜  DNA提取  InDel  引物筛选
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