新孢子虫P0基因DNA疫苗免疫沙鼠诱导的免疫应答

为了筛选得到免疫效果较理想的核酸疫苗,采用pVAXⅠ为真核表达载体,新孢子虫P0基因为目的基因,构建了重组质粒pVAXⅠ-NcP0。用重组质粒免疫成年沙鼠60只,剂量为100μg/只,每隔14 d免疫1次,共免3次,首免后每周尾静脉采血1次,三免后第2周,每组处死7只沙鼠,无菌取脾。采用间接荧光抗体试验检测沙鼠血清抗体效价,流式细胞仪检测脾T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+数量。结果:Cp-M佐剂组、pVAXⅠ-NcP0组的抗体效价均高于pVAXⅠ空载体组和对照组,其中Cp-M组效价最高;脾T淋巴细胞亚群数量测定发现,疫苗Cp-M佐剂组、pVAXⅠ-NcP0组的CD4+细胞含量均高于pVAXⅠ空载体组和对照组,Cp-M组、pVAXⅠ-NcP0组与pVAXⅠ空载体组和对照组均差异极显著(P<0.01),Cp-M组、pVAXⅠ-NcP0组的CD8+细胞含量均高于pVAXⅠ空载体组和对照组,Cp-M佐剂组与pVAXⅠ空载体组和对照组差异显著(P<0.05)。表明DNA疫苗pVAXⅠ-NcP0既能较好地刺激细胞免疫又能产生一定的体液免疫反应,可作为候选核酸疫苗进行下一步本体动物免疫试验研究。