| 农杆菌子房注射法对金钗石斛的活体转化研究 |
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| 引用本文： | 刘其府,董 会,曾宋君,陈之林,吴坤林,张建霞,段 俊. 农杆菌子房注射法对金钗石斛的活体转化研究[J]. 华南农业大学学报, 2013, 34(3): 378-382 |
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| 作者姓名： | 刘其府 董 会 曾宋君 陈之林 吴坤林 张建霞 段 俊 |
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| 作者单位： | 1 中国科学院 华南植物园,华南农业植物遗传育种重点实验室， 2中国科学院大学;1 中国科学院 华南植物园,华南农业植物遗传育种重点实验室， 3 华南农业大学 生命科学学院，;1 中国科学院 华南植物园,华南农业植物遗传育种重点实验室，;4 贵州园艺研究所，;1 中国科学院 华南植物园,华南农业植物遗传育种重点实验室，;1 中国科学院 华南植物园,华南农业植物遗传育种重点实验室，;1 中国科学院 华南植物园,华南农业植物遗传育种重点实验室， |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31160400） |
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| 摘 要： | 对金钗石斛 Dendrobium nobile 进行人工自花授粉，在授粉之后10、20、30、40、45、50和60 d分别将工程化根癌农杆菌 Agrobacterium tumefaciens EHA105(pCAMBIA1301)直接注射入子房内部.150 d后，金钗石斛蒴果成熟，摘取果实，进行种子β-葡萄糖苷酸酶（GUS）染色、无菌播种、潮霉素筛选以及PCR检测试验.结果表明：子房注射对果实发育具有较大影响，在授粉后10~30 d进行子房注射后，果实脱落；在授粉后45 d进行子房注射，成熟果实注射部位的种子GUS染色率最高，可达18%；无菌播种之后，经潮霉素筛选，获得11株幼苗，每株植株均表现出GUS染色反应；随机挑选4株幼苗进行PCR检测，发现均能扩增出预期条带，说明外源基因已经整合到植株基因组内.农杆菌子房注射法在兰科植物转基因的成功应用，可以为兰科植物育种提供一种简单高效的方法.
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| 关 键 词： | 金钗石斛；农杆菌子房注射法；GUS组织化学染色；活体转化 PCR检测 |
| 收稿时间： | 2012-03-21 |
In Planta Transformation of Dendrobium nobile by Ovary-Injection of Agrobacterium |
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| Affiliation: | 1 Key Laboratory of South China Agricultural Plant Genetics and Breeding, South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, 2 University of Chinese Academy of Sciences,;1 Key Laboratory of South China Agricultural Plant Genetics and Breeding, South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, 3 College of Life Science, South China Agricultural University,;1 Key Laboratory of South China Agricultural Plant Genetics and Breeding, South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences,;4 Horticultural Research Institute of Guizhou Province,;1 Key Laboratory of South China Agricultural Plant Genetics and Breeding, South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences,;1 Key Laboratory of South China Agricultural Plant Genetics and Breeding, South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences,;1 Key Laboratory of South China Agricultural Plant Genetics and Breeding, South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, |
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