一株分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞的鉴定

目的]应用杂交瘤技术获得稳定分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法]先将原核表达产物His—PoIFN一γ免疫BALB／c小鼠4次，然后进行细胞融合，再以纯化的GST—PoIFN一1作为包被抗原，用间接ELISA筛选阳性杂交瘤无性系，最终获得能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株，对其进行问接ELISA和Westernblot检测。结果]试验获得l株能稳定分泌抗猪IFN一1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，被命名为B3株，经间接ELISA和Westernblot检测，该株分泌的抗体能与融合蛋白His—PoIFN一γ和GST—PoIFN一γ发生特异性反应，而与其他表达鸡γ-干扰素、His和GST蛋白等的重组质粒均不发生反应。B3株分泌的抗体小鼠腹水的ELISA效价达到1：160000，抗体亚型为IgG1型，且轻链为κ链。结论]该研究为建立猪γ-干扰素检测方法，研究机体的免疫状态及免疫机制提供了技术基础。