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甜菜DAMD-PCR体系的建立及优化
引用本文:兴旺,童乐怡,孙燕红,马龙彪,吴则东.甜菜DAMD-PCR体系的建立及优化[J].中国农学通报,2017,33(23):6-9.
作者姓名:兴旺  童乐怡  孙燕红  马龙彪  吴则东
作者单位:黑龙江省普通高校甜菜遗传育种重点实验室/黑龙江大学,黑龙江省普通高校甜菜遗传育种重点实验室/黑龙江大学,黑龙江省普通高校甜菜遗传育种重点实验室/黑龙江大学,黑龙江省普通高校甜菜遗传育种重点实验室/黑龙江大学,黑龙江省普通高校甜菜遗传育种重点实验室/黑龙江大学
基金项目:国家糖料现代农业产业技术体系甜菜高品质品种改良岗位专项基金“国家现代农业产业技术体系建设项目东北区育种岗位专家”(CARS- 210104);农业部物种资源保护费项目“(甜菜种质资源收集鉴定编目繁种保存与利用)”(1120162130135252026);科技部、财政部国家科技基础条件平 台项目“国家甜菜种质资源平台”(NICGR2016-017)。
摘    要:为了建立甜菜DAMD扩增体系,以期利用DAMD引物应用于甜菜品种指纹图谱的构建及分子标记辅助育种。本实验利用单因素变量的方法对甜菜DAMD体系进行优化。同时选用12个甜菜品种,利用优化的体系对25条DAMD引物进行扩增。获得甜菜的最适DAMD体系:总体积为20μL,包含模板DNA 10~80 ng、0.75 U的DNA聚合酶、0.2μL的d NTPs(2.5 mmol/L each)以及2.0μL的引物(10μmol/L)。同时25条引物均扩增出了清晰条带,除了个别引物多态性较差外,其余引物多态性都非常的丰富,其中引物62H(-)就可以把实验中用到的12个甜菜品种全部区分开。由此可见,DAMD引物的扩增效率很高,并且扩增结果稳定,条带清晰,非常适合甜菜品种指纹图谱的构建及遗传多样性分析。

关 键 词:甜菜  DAMD  体系优化  指纹图谱  DNA
收稿时间:2017/4/18 0:00:00
修稿时间:2017/6/8 0:00:00

Construction and Optimization of DAMD-PCR in Beet
Abstract:
Keywords:beet  direct amplification of mini satellite DNA by PCR  system optimization  fingerprinting  DNA
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