| 猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 时晓丽,谈晨,赵攀登,白娟,李玉峰,姜平.猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J].畜牧与兽医,2014(5):1-5. |
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| 作者姓名： | 时晓丽 谈晨 赵攀登 白娟 李玉峰 姜平 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 |
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| 基金项目： | 国家生猪产业技术体系专项(CARS-36);江苏省科技支撑计划(BE2012368);农业部行业专项子项目(201003060 04);江苏省教育厅产业发展项目(JH09-1) |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR扩增猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白基因并克隆至原核表达载体pET-28a,转化到宿主表达菌BL21后经IPTG诱导表达和Ni柱纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组N蛋白,其大小约为58 ku。将纯化重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合,PEDV间接ELISA方法筛选,制备获得4株能稳定分泌PEDV抗体的杂交瘤细胞株1C9、4C8、4F8和6A11。Western blot和间接免疫荧光试验证明其与PEDV均有特异性反应,单抗亚类鉴定均属于IgG1,轻链为κ型。杂交瘤细胞培养上清ELISA抗体效价为1∶1 600~6 400,腹水ELISA抗体效价达1∶1.024×105以上;4株细胞连续培养20代,其ELISA抗体效价基本一致。本研究为PEDV感染的诊断和致病机制研究提供了有用工具。
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 单克隆抗体 |
Preparation and identification of monoclonal antibodies against the nucleocapsid protein of porcine epidemic diarrhea virus |
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| SHI Xiaoli;TAN Chen;ZHAO Pandeng;BAI Juan;LI Yufeng;JIANG Ping.Preparation and identification of monoclonal antibodies against the nucleocapsid protein of porcine epidemic diarrhea virus[J].Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2014(5):1-5. |
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| Authors: | SHI Xiaoli;TAN Chen;ZHAO Pandeng;BAI Juan;LI Yufeng;JIANG Ping |
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| Institution: | SHI Xiaoli;TAN Chen;ZHAO Pandeng;BAI Juan;LI Yufeng;JIANG Ping;Key Laboratory of Animal Disease Diagnostic and Immunology,Ministry of Agriculture,Nanjing Agricultural University; |
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