表达A型产气荚膜梭菌FBA蛋白的延迟裂解型沙门菌载体的构建 |
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引用本文: | 姜延龙,王占楠,曾庆丰,王棋,姚心茹,王成宇,胡译文,杨桂连,王春凤.表达A型产气荚膜梭菌FBA蛋白的延迟裂解型沙门菌载体的构建[J].中国兽医学报,2018(5). |
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作者姓名: | 姜延龙 王占楠 曾庆丰 王棋 姚心茹 王成宇 胡译文 杨桂连 王春凤 |
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作者单位: | 吉林农业大学动物科学技术学院/吉林省动物微生态制剂工程研究中心 |
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摘 要: | 利用PCR技术扩增FBA基因序列,并将其克隆到表达载体pET-30a(+)中,获得pET-30a-FBA重组质粒。将重组质粒转化到BL21感受态细胞中,经IPTG诱导表达His-FBA蛋白,通过His-tag Ni柱亲和层析纯化后,免疫新西兰大白兔制备FBA特异性多克隆抗体。再利用PCR技术将FBA基因与表达载体pYA3681连接,构建了表达载体pYA5129,电转至延迟裂解性沙门菌χ11802后以制备的FBA多抗为一抗进行免疫印迹试验,验证了其免疫原性;同时比较了不同浓度阿拉伯糖对重组沙门菌生长性能的影响,优化了阿拉伯糖最佳添加浓度,为后续研究其作为肉鸡坏死性肠炎疫苗的可行性奠定基础。
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