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| 表达猪瘟E2基因的重组伪狂犬病毒构建及其 生物学特性分析 | |
| 引用本文： | 韩爽. 表达猪瘟E2基因的重组伪狂犬病毒构建及其 生物学特性分析[J]. 中国兽药杂志, 2018, 52(5): 29-37 |
| 作者姓名： | 韩爽 |
| 作者单位： | 中国兽医药品监察所 |
| 基金项目： | 中国兽医药品监察所所级课题（201601） |
| 摘 要： | 以构建的TK、gI、gE、US9、部分gN基因缺失的绿色荧光标记猪伪狂犬病毒rPRV-BE为亲本株,通过同源重组构建了表达猪瘟病毒(CSFV C株)主要免疫原性基因E2的重组伪狂犬病毒rPRV-CSFV PE2SC。经PCR、间接免疫荧光试验(IFA)鉴定证实构建正确,并能成功表达E2蛋白。同时,对重组病毒在PK15细胞中的遗传稳定性、增殖特性等进行了研究,结果显示第5、10、15、20代重组病毒经PCR均能扩增出与原代重组病毒相同大小的约为3469 bp含猪瘟病毒E2基因的重组片段;第20代重组病毒感染细胞孔中出现明显的针对E2蛋白的荧光,表明重组病毒在体外连续传20代后仍能稳定遗传。一步生长曲线测定结果表明,与野毒PRV(SX株)、亲本毒rPRV-BE相比,重组病毒rPRV-CSFV PE2SC前期增殖速度较快,病毒滴度到达峰值的时间早,峰值病毒滴度低于野毒,与亲本毒相当,最高病毒滴度依次为10~(6.7)TCID_(50)/mL、10~(8.0)TCID_(50)/mL、10~(7.0)TCID_(50)/mL。结果显示构建的重组病毒具有良好的遗传稳定性及体外复制能力,为进一步对其免疫效果的评价以及PRV基因缺失重组疫苗的研制奠定基础。 |
| 关 键 词： | 伪狂犬病毒；猪瘟病毒；基因缺失；同源重组；生物学特性 |
| 收稿时间： | 2018-02-09 |
| 修稿时间： | 2018-04-16 |
Construction of Recombinant Pseudorabies Virus (PRV) Expressing E2 Gene of Classical Swine Fever Virus (CSFV) and Analysis of Its Biological Characteristics |
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| Affiliation: | China Institute of Veterinary Drug Control |
| Abstract: | |
| Keywords: | Pseudorabies virus (PRV) Classical swine fever virus (CSFV) Gene deletion Homologous recombination Biological characteristics |
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