| 巴马小型猪内源性反转录病毒感染对HEK293细胞周期调控相关基因mRNA表达的影响 |
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| 引用本文： | 刘金凤,唐海波,马玲,钟华,白安斌,陈凤莲,覃绍敏,吴健敏.巴马小型猪内源性反转录病毒感染对HEK293细胞周期调控相关基因mRNA表达的影响[J].中国兽医学报,2018(3):433-441. |
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| 作者姓名： | 刘金凤 唐海波 马玲 钟华 白安斌 陈凤莲 覃绍敏 吴健敏 |
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| 作者单位： | 广西壮族自治区兽医研究所;广西兽医生物技术重点实验室;广西中医药大学基础医学院;广西民族大学海洋与生物技术学院; |
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| 摘 要： | 以巴马小型猪内源性反转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)感染HEK293细胞模型(PERV-BMHEK293)为研究对象,分析PERV整合对HEK293细胞活性的影响,同时建立7种与人细胞增殖和周期调控密切相关基因的实时荧光定量PCR(q-PCR)检测方法,并对细胞感染模型中7个基因的mRNA表达情况进行分析。细胞活力分析结果显示,随着培养代次及培养时间增加,相对于母源HEK293细胞PERV感染模型的细胞活力下降;qPCR检测方法建立结果显示,所构建的cyclinD1、CDK1、CDK4、k-ras、c-myc、p53、p16基因检测方法检测各基因在1.0×10~1~1.0×10~9 copies/μL反应范围内有很好的线性关系,扩增产物熔解曲线只出现特异性单峰,各组内变异系数在0.31%~2.01%之间,组间变异系数在0.46%~2.19%之间,重复性好,可稳定地用于相关基因mRNA的定量检测。用建立的q-PCR检测方法对PERV感染模型进行细胞周期调控相关基因mRNA表达分析,结果显示,与母源细胞相比,模型细胞cyclinD1、CDK1、CDK4、k-ras、p53和p16基因的mRNA表达无明显变化,原癌基因c-myc基因表达下调,提示PERV感染可能抑制c-myc基因表达。该研究结果可为评价巴马小型猪来源PERV在人-猪异种移植中生物安全性提供参考。
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| 关 键 词： | 猪内源性反转录病毒 细胞模型 荧光定量PCR 基因表达分析 |
Effects of BM porcine endogenous retrovirus infection on the expression of cyclinrelated genes in HEK293 cells |
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