| 梅花鹿Thymosin beta 10基因的原核表达、活性鉴定和多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 褚文辉,张伟,赵海平,王大涛,李春义.梅花鹿Thymosin beta 10基因的原核表达、活性鉴定和多克隆抗体制备[J].中国农业大学学报,2018,23(11):72-79. |
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| 作者姓名： | 褚文辉 张伟 赵海平 王大涛 李春义 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院 特产研究所/特种经济动物分子生物学国家重点实验室/吉林省鹿茸工程研究中心, 长春 130012,中国农业科学院 特产研究所/特种经济动物分子生物学国家重点实验室/吉林省鹿茸工程研究中心, 长春 130012,中国农业科学院 特产研究所/特种经济动物分子生物学国家重点实验室/吉林省鹿茸工程研究中心, 长春 130012,中国农业科学院 特产研究所/特种经济动物分子生物学国家重点实验室/吉林省鹿茸工程研究中心, 长春 130012,中国农业科学院 特产研究所/特种经济动物分子生物学国家重点实验室/吉林省鹿茸工程研究中心, 长春 130012;长春科技学院, 长春 130600 |
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| 基金项目： | 吉林省自然科学基金项目（20170101032JC，20170101003JC）；中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（1610342018028） |
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| 摘 要： | 为研究梅花鹿Thymosin beta 10基因(Tβ10)在鹿茸快速生长过程中的作用,利用Gateway技术构建梅花鹿Tβ10基因的原核表达载体—pDEST17-Tβ10并诱导表达,对融合蛋白进行功能检测及多克隆抗体制备。结果表明:1)获得了190bp Tβ10基因开放阅读框序列,并获得重组表达载体pDEST17-Tβ10。2)pDEST17-Tβ10在宿主BL21-SI中诱导表达条件为0.3mol/L NaCL诱导2h,获得产物的最终浓度为0.50mg/mL。3)制备的Tβ10蛋白多克隆抗体血清效价在105之上,该抗体可以特异性结合天然和原核表达的Tβ10蛋白。4)离体检测发现,Tβ10融合蛋白一方面可以促进人脐静脉内皮细胞增殖,另一方面可以抑制鹿茸前成软骨区细胞的增殖。综上所述,本研究获得了具有生物活性的Tβ10融合蛋白,并制备了高度特异性的梅花鹿Tβ10蛋白多克隆抗体,为深入研究Tβ10基因的生物学功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 梅花鹿 Thymosin beta 10 原核表达 鹿茸 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2017/2/15 0:00:00 |
Prokaryotic expression, activity testing and polyclonal antibody preparation of thymosin beta 10 gene of sika deer |
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| CHU Wenhui,ZHANG Wei,ZHAO Haiping,WANG Datao and LI Chunyi.Prokaryotic expression, activity testing and polyclonal antibody preparation of thymosin beta 10 gene of sika deer[J].Journal of China Agricultural University,2018,23(11):72-79. |
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| Authors: | CHU Wenhui ZHANG Wei ZHAO Haiping WANG Datao and LI Chunyi |
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| Institution: | Institute of Special Animal and Plant Sciences/State Key Laboratory for Molecular Biology of Special Economic Animals/Deer Antler Engineering Research Center of Jilin Province, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130012, China,Institute of Special Animal and Plant Sciences/State Key Laboratory for Molecular Biology of Special Economic Animals/Deer Antler Engineering Research Center of Jilin Province, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130012, China,Institute of Special Animal and Plant Sciences/State Key Laboratory for Molecular Biology of Special Economic Animals/Deer Antler Engineering Research Center of Jilin Province, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130012, China,Institute of Special Animal and Plant Sciences/State Key Laboratory for Molecular Biology of Special Economic Animals/Deer Antler Engineering Research Center of Jilin Province, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130012, China and Institute of Special Animal and Plant Sciences/State Key Laboratory for Molecular Biology of Special Economic Animals/Deer Antler Engineering Research Center of Jilin Province, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130012, China;Changchun Sci-Tech University, Changchun 130600, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | sika deer thymosin beta 10 prokaryotic expression antler polyclonal antibody |
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