| 草鱼出血病病毒VP6蛋白的原核表达、纯化及免疫效果 |
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| 作者姓名： | 刘林 徐诗英 李婧慧 邹勇 倪金俤 杨鸢劼 曹广力 薛仁宇 陈辉 贡成良 |
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| 作者单位： | 1. 苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123
2. 江苏省水生动物疫病预防控制中心,江苏南京210036;南京师范大学生命科学学院,江苏南京210046
3. 江苏省水生动物疫病预防控制中心,江苏南京,210036 |
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| 基金项目： | 苏州市自然科学基金(SYN201106);江苏省科技支撑计划项目(BE2009387);江苏省农业科技自主创新资金项目(SCX(11)2165) |
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| 摘 要： | 为了探讨草鱼出血病病毒(GCRV)VP6亚单位疫苗对草鱼出血病的免疫保护作用,将vp6基因克隆进原核表达载体pET-28a(+),构建了重组质粒pET28a(+)-VP6。SDS-PAGE和Western-blotting显示,重组VP6蛋白的分子量约为43 ku,主要以包涵体形式存在,重组蛋白占菌体总蛋白的20%左右;Ni2+柱纯化后的重组蛋白,以每尾500μg肌肉注射免疫草鱼(14～20 cm,60～120 g),并在第14、21、28、49、70天通过间接凝集反应检测抗体水平,结果显示,免疫注射后第14天可检测到鱼体产生的特异性抗体,第21天达到最高峰,第70天仍可检测到抗体的存在;免疫注射第21天人工接种GCRV,免疫后的草鱼对出血病的保护力达100%。
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| 关 键 词： | 草鱼出血病病毒 原核表达 纯化 免疫 |
| 收稿时间： | 2011-11-03 |
| 修稿时间： | 2011-12-08 |
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