栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒cDNA文库的构建及部分序列分析 |
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作者姓名: | 王崇明 艾海新 刘英杰 王秀华 李赟 |
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作者单位: | 1. 中国水产科学研究院,黄海水产研究所,山东,青岛,266071 2. 中国水产科学研究院,黄海水产研究所,山东,青岛,266071;中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室,山东,青岛,266003 3. 中国水产科学研究院,北京,100039 4. 中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室,山东,青岛,266003 |
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基金项目: | 科技部科研项目;山东省科技攻关项目 |
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摘 要: | 急性病毒性坏死症病毒(Acute Virus Necrobiotic Virus,AVNV)已被证实是一种对养殖栉孔扇贝(Chlamys farreri)危害极大的致病病原.本研究应用基因克隆技术对AVNV基因组进行cDNA合成、克隆,并对部分克隆进行序列分析.采用差速和蔗糖密度梯度离心法,分离纯化AVNV.用Trizol试剂抽提病毒RNA,采用随机引物和Oligo(dT)双引物法,SuperScriptⅡ反转录酶合成cDNA,并克隆于pUC118质粒上,利用蓝白斑筛选阳性克隆子,PCR法快速鉴定重组质粒.经筛选得到2个阳性克隆23^#、52^#,插入片段大小约为1200 bp和800 bp.测序结果与GenBank的比对分析显示,尚未有类似的序列报道,提示该病毒可能为一种新发现的病毒.[中国水产科学,2006,13(3):421-425]
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关 键 词: | 栉孔扇贝 急性病毒性坏死病毒 cDNA文库 克隆 序列分析 |
文章编号: | 1005-8737-(2006)03-0421-05 |
收稿时间: | 2005-01-13 |
修稿时间: | 2005-11-14 |
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