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| 饲养层细胞的接种密度对分离培养胚胎干细胞的影响 | |
| 引用本文： | 赵晶,董雅娟,柏学进,靳亚平,张廷龙,封纪武.饲养层细胞的接种密度对分离培养胚胎干细胞的影响[J].中国兽医学报,2009,29(4). |
| 作者姓名： | 赵晶 董雅娟 柏学进 靳亚平 张廷龙 封纪武 |
| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学,农业部家畜内分泌与,胚胎工程重点开放实验室,陕西,杨凌,712100;青岛农业大学,动物胚胎工程中心,山东,青岛,266109 2. 青岛农业大学,动物胚胎工程中心,山东,青岛,266109;山东小黑牛集团公司,山东,淄博,255000 3. 西北农林科技大学,农业部家畜内分泌与,胚胎工程重点开放实验室,陕西,杨凌,712100 4. 青岛农业大学,动物胚胎工程中心,山东,青岛,266109 |
| 摘 要： | 建立有效的昆明白小鼠胎儿成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast,MEF)饲养层培养体系,用于分离和培养小鼠胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ES细胞)的研究.(1)取怀孕14.5 d昆明白小鼠胎儿分离成纤维细胞,利用体外培养体系分离传代,选取生长旺盛并且已纯化的P3代的MEF,经丝裂霉素处理后.用细胞计数板计算活细胞数,分别按1×104、1×106、1×108/mL密度接种,制备饲养层,观察不同密度饲养层的生长状况.(2)取怀孕4 d的昆明白小鼠囊胚,接种在不同密度饲养层上.观察不同密度饲养层上囊胚、ICM及ES细胞的克隆生长情况.结果显示:囊胚在密度为1 × 106/mL的饲养层上,贴壁率和ICM孵出率分别为(97.0±3.606)%和(96.3±2.887)%,显著高于其他2组;密度为1×104/mL饲养层上的ES细胞克隆形成率高于密度为1×104/mL(差异极显著,P<0.01)和1×108/mL饲养层上的ES细胞克隆形成率(差异显著,P<0.05);而1×104/mL饲养层和1×108/mL饲养层上的ES细胞克隆形成率差异不显著(P>0.05).结果表明:以1×104/mL密度接种的MEF作为饲养层,最适合用于分离培养昆明白小鼠ES细胞,有利于囊胚的发育,ICM的增殖,促进ES细胞的增殖,并起到抑制其分化的作用. |
| 关 键 词： | 昆明白小鼠 胎儿成纤维细胞 饲养层 胚胎干细胞 |
Effect of densities of feeder layer for isolation and culturing of Kunming white mouse embryonic stem cells |
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| ZHAO Jing,DONG Ya-juan,BAI Xue-jin,JIN Ya-ping,ZHANG Ting-long,FENG Ji-wu.Effect of densities of feeder layer for isolation and culturing of Kunming white mouse embryonic stem cells[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2009,29(4). | |
| Authors: | ZHAO Jing DONG Ya-juan BAI Xue-jin JIN Ya-ping ZHANG Ting-long FENG Ji-wu |
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| Keywords: | |
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