| 4种重要外来病毒高通量液相芯片检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 仇汝龙,阮智杨,胡波,魏后军,范志宇,宋艳华,陈萌萌,徐为中,王芳.4种重要外来病毒高通量液相芯片检测方法的建立[J].江苏农业科学,2021,49(13):51-55. |
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| 作者姓名： | 仇汝龙 阮智杨 胡波 魏后军 范志宇 宋艳华 陈萌萌 徐为中 王芳 |
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| 作者单位： | 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程重点实验室,江苏南京210014 |
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| 摘 要： | 为建立小反刍兽疫病毒(PPRV)、西尼罗病毒(WNV)、裂谷热病毒(RVFV)和南非型口蹄疫病毒(SAT FMDV)的高通量液相芯片检测方法,根据GenBank上公布的PPRV的N蛋白基因序列、WNV的E蛋白基因序列、RVFV的S片段基因序列和FMDV的5′UTR区基因序列,并基于各基因保守区设计相应的引物和探针.通过对多重PCR的上游、下游引物比例、杂交温度、杂交时间进行条件优化,并验证检测方法的特异性和敏感性.敏感性试验显示,该方法对于PPRV、WNV、RVFV以及FMDV 4种病毒最低检出量分别为5.78×103、2.15×103、2.98×105、9.54×104 copies/μL.本研究建立的高通量液相芯片检测方法能够同时快速地检测4种外来病病毒,具有良好的特异性、敏感性和稳定性,对于流行病学调查和防范外来动物疫病具有重要的意义.
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| 关 键 词： | 检测方法 液相芯片 基因序列 条件优化 流行病学 |
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