环磷酰胺诱导的尼罗罗非鱼体内外肝损伤模型的构建

以环磷酰胺(CTX)为诱导物,建立罗非鱼体内外急性肝损伤模型。体外,0、5、10、15、20和25 mmol·L^-1 CTX 分别作用于离体培养的罗非鱼精密肝切片（PCLS）6 h 后,测定切片培养上清中谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）和乳酸脱氢酶（LDH）水平,同时收集肝切片,用噻唑蓝（MTT）法检测肝切片增殖活性,测定切片内总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）、过氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）水平。体内,采用胸腔注射法造模,每千克鱼体重分别注射0、10、25、75和100 mg环磷酰胺（下文以mg·kg^-1表示）,每隔3 d给药1次,连续3次。末次给药后第4天取血,测定罗非鱼血清中GPT、 GOT 和LDH及肝组织匀浆中T-AOC 、MDA、SOD和GSH水平。结果显示： 20～25 mmol·L^-1 CTX作用体外培养精密肝切片6 h及75～100 mg·kg^-1 CTX胸腔注射罗非鱼后,均可以导致GPT、GOT和 LDH 活力显著升高;T-AOC、SOD活力及GSH含量显著下降,MDA含量显著提高。同时,20 和25 mmol·L^-1 CTX能导致肝切片增殖活性显著下降,分别为空白对照组的67.29%和55.41%,且有剂量依赖性。结果表明：CTX可引起罗非鱼肝损伤;分别采用20 mmol·L^-1 CTX 作用体外培养PCLS 6 h或者采用75～100 mg·kg^-1 CTX胸腔注射罗非鱼,每隔3 d给药1次,连续3次,均可以构建体内外急性肝损伤模型。