狂犬病的分子生物学诊断 |
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作者姓名: | 殷相平 柳纪省 胡永浩 张兴旺 李志勇 王辉 李宝玉 兰喜 |
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作者单位: | [1]甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070 [2]中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046 [3]甘肃省人民医院,甘肃兰州730000 |
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摘 要: | 从攻击咬伤人并致其死亡的犬脑组织中提取总RNA,用特异性引物通过反转录聚合酶链反应(RT—PCR)获得了长度约为1423bp的核酸片段,与预期的片段大小相符;将扩增产物连接到pMD18-T载体中,转化大肠埃希氏菌JM109,筛选氨苄青霉素抗性菌落,提取质粒,经酶切鉴定、PCR分析及测序,证明所克隆的1423bp片段含有完整的狂犬病病毒N基因,与国外参考毒株的序列相比同源性较高,从而做出正确的诊断。试验表明,用RT—PCR技术检测狂犬病病毒灵敏度高、特异性强,适合于实验室应用。
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关 键 词: | 狂犬病 分子生物学 诊断 狂犬病病毒 人畜共患 急性传染病 |
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