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间接酶免疫组化检测DPV在感染鸭体内细胞定位的研究和应用
引用本文:徐超,程安春,汪铭书,文明,刘菲,韩小英,宋涌,廖永洪,陈孝跃.间接酶免疫组化检测DPV在感染鸭体内细胞定位的研究和应用[J].中国兽医学报,2007,27(5):640-644.
作者姓名:徐超  程安春  汪铭书  文明  刘菲  韩小英  宋涌  廖永洪  陈孝跃
作者单位:1. 四川农业大学,动物科技学院,四川,雅安,625014;四川农业大学,动物疫病和人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014
2. 四川农业大学,动物疫病和人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014
3. 四川农业大学,动物疫病和人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014;四川省精华企业集团有限责任公司,四川,简阳,641400
基金项目:国家科技攻关项目;四川省杰出青年学科带头人培养计划;四川省重点学科建设项目
摘    要:以超速离心浓缩结合蔗糖密度梯度离心法提纯的鸭瘟病毒(DPV)作为抗原免疫家兔制备兔抗DPV血清,用饱和硫酸铵沉淀结合DEAE-Sephedax-A-50离子交换柱层析提纯兔抗DPV IgG,建立了检测甲醛固定鸭体组织石蜡切片上DPV抗原的间接酶免疫组化法。该法能特异地检测出DPV感染鸭组织中的DPV而对鸭疫里默氏菌、鸭源多杀性巴氏杆菌(5∶A)、鸭源大肠杆菌(O1)感染致死的鸭组织以及正常鸭组织呈阴性反应,检测DPV感染死亡鸭的肝、十二指肠、脑、脾和胸腺的结果与PCR检测结果相同。其敏感性高于原位杂交。对DPV CH强毒株人工感染致死鸭的检测结果表明,该法可特异检测到肝、肺、肾、脑、十二指肠、空肠、回肠、直肠、法氏囊、脾脏、腺胃以及食管中的DPV。DPV主要分布于这些器官的上皮细胞和巨噬细胞。对1992-2004年经10%福尔马林保存的鸭瘟临床病例的肝脏检测结果均为阳性。该法可用于DPV感染鸭的诊断和定位检测,也可用于对甲醛固定组织进行回顾性诊断检测。

关 键 词:间接酶免疫组化法  鸭瘟病毒  抗原定位  
文章编号:1005-4545(2007)05-0640-05
修稿时间:2005-10-25

Study and application on cellular localization of DPV antigens in infected ducks by indirect immunoperoxidase technique
XU Chao,CHENG An-chun,WANG Ming-shu,WEN Ming,LIU Fei,HAN Xiao-ying,SONG Yong,LIAO Yong-hong,CHEN Xiao-yue.Study and application on cellular localization of DPV antigens in infected ducks by indirect immunoperoxidase technique[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(5):640-644.
Authors:XU Chao  CHENG An-chun  WANG Ming-shu  WEN Ming  LIU Fei  HAN Xiao-ying  SONG Yong  LIAO Yong-hong  CHEN Xiao-yue
Institution:1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Yaan, Sichuan 625014, China ;2. Key Laboratory of Animal Disease and Hu man Health of Sichuan Province, Sichuan Agricultural University, Yaan, Sichuan 625014, China ; 3. Jinghua Group of Sichuan Province, Jianyang , Sichuan 641400, China
Abstract:
Keywords:indirect immunoperoxidase  duck plague virus  antigen localization  duck
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