| 扩增内标在副溶血弧菌多重PCR检测方法中的应用 |
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| 引用本文： | 吕淑霞,祝儒刚,刘月萍,张喆,胡英. 扩增内标在副溶血弧菌多重PCR检测方法中的应用[J]. 沈阳农业大学学报, 2010, 41(6) |
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| 作者姓名： | 吕淑霞 祝儒刚 刘月萍 张喆 胡英 |
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| 基金项目： | 教育部留学回国人员基金，辽宁省科技厅资助项目，沈阳市科技局资助项目 |
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| 摘 要： | 建立扩增内标存在下同时检测副溶血弧菌tlh基因和trh基因的多重PCR方法。以细菌16SrDNA片段为扩增内标对照(internal amplification control,IAC),副溶血弧菌不耐热溶血毒素(thermolabile hemolysin,TLH)基因tlh和相对耐热直接溶血毒素(thermostable related hemolysin,TRH)基因trh为检测基因,设计引物,并优化多重PCR体系。特异性及灵敏度试验结果表明:该多重PCR体系检测致病性副溶血弧菌表现出极好的特异性。纯培养条件下,扩增内标存在时tlh基因和致病基因trh的检测灵敏度分别为1.3×102 cfu.mL-1和1.3×103 cfu.mL-1;人工污染牡蛎样品,不经富集培养,扩增内标存在时tlh基因和致病基因trh的检测灵敏度分别为2.6×103 cfu.mL-1和2.6×104 cfu.mL-1;经过6h的富集培养,tlh基因和trh基因的检测限均能达到2.6×102 cfu.mL-1。该检测体系特异性强、灵敏度高,并且扩增内标的存在可排除PCR检测致病性副溶血弧菌可能导致的假阴性结果,可提高检测的速度和精准度。
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| 关 键 词： | 扩增内标对照 多重PCR 副溶血弧菌 特异性 灵敏度 |
Multiplex PCR Assay for the Detection of Pathogenic Vibrio Parahaemolyticus in Seafood in the Presence of Internal Amplification Control |
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| L Shu-xia,ZHU Ru-gang,LIU Yue-ping,ZHANG Zhe,HU Ying. Multiplex PCR Assay for the Detection of Pathogenic Vibrio Parahaemolyticus in Seafood in the Presence of Internal Amplification Control[J]. Journal of Shenyang Aricultural University, 2010, 41(6) |
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| Authors: | L Shu-xia ZHU Ru-gang LIU Yue-ping ZHANG Zhe HU Ying |
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| Affiliation: | L(U) Shu-xia,ZHU Ru-gang,LIU Yue-ping,ZHANG Zhe,HU Ying |
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