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猪圆环病毒多重PCR检测方法的建立
引用本文:杨泽晓,庞 歌,王 印,姚学萍,张彦明,杨增岐,汪开毓,戴晓懿.猪圆环病毒多重PCR检测方法的建立[J].西北农业学报,2010,19(11):8-12.
作者姓名:杨泽晓  庞 歌  王 印  姚学萍  张彦明  杨增岐  汪开毓  戴晓懿
作者单位:1. 四川农业大学,动物医学院,四川雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安,625014
2. 河南农业职业学院,河南中牟,451450
3. 四川农业大学,动物医学院,四川雅安,625014
4. 西北农林科技大学,动物医学院,陕西杨凌,712100
基金项目:教育部“长江学者和创新团队发展计划”创新团队项目(IRTO848); 四川农业大学双支计划(00270401)
摘    要:为建立PCV1和PCV2混合感染快速检测的PCR方法,根据GenBank已发表PCV1和PCV2全基因组序列,设计合成4条引物,通过PCV1和PCV2阳性质粒的构建、反应条件的优化、敏感性试验和特异性试验,建立了PCV多重PCR检测方法,可扩增出PCV1和PCV2长度分别为726 bp和433 bp特异性目的基因片段。结果显示,建立的PCV多重PCR可检测到5×101个拷贝的PCV1和PCV2目的基因,HCV、PRV、PPV核酸扩增均为阴性,具有良好的特异性和敏感性。并初步应用建立的方法对42份采自四川省部分地区的样品进行检测,结果表明,PCV1阳性率为33.3%,PCV2阳性率为45.2%,其中PCV1和PCV2混合感染阳性率为16.6%。

关 键 词:猪圆环病毒  多重PCR  检测  

Development of Multiplex PCR Detection for Porcine Circovirus
YANG Zexiao,PANG Ge,WANG Yin,YAO Xueping,ZHANG Yanming,YANG Zengqi,WANG Kaiyu and DAI Xiaoyi.Development of Multiplex PCR Detection for Porcine Circovirus[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2010,19(11):8-12.
Authors:YANG Zexiao  PANG Ge  WANG Yin  YAO Xueping  ZHANG Yanming  YANG Zengqi  WANG Kaiyu and DAI Xiaoyi
Institution:YANG Zexiao1,4,PANG Ge3,WANG Yin1,YAO Xueping1,ZHANG Yanming2,YANG Zengqi2,WANG Kaiyu1 and DAI Xiaoyi1(1.College of Veterinary Medicine,Sichuan Agricultural University,Yaan Sichuan 625014,China,2.College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling Shaanxi 712100,3.Henan Agricultural Vocational College,Zhongmou Henan 451450,4.Key laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province,China)
Abstract:In order to develop PCRmethod for the detection of co-infection of PCV1 and PCV2,4 primers were designed to amplify a 726 bp PCV1 specific DNA fragment and a 433 bp PCV2 specific DNA fragment according to the published genome sequences of porcine circovirus type 1(PCV1) and type 2(PCV2) in GenBank,then the multiplex PCR method was developed and optimized for rapid and simultaneous detection of PCV1 and PCV2.The sensitivity and specificity of the method were evaluated with the constructed recombinant plasmid...
Keywords:Porcine circovirus  Multiplex PCR  Detection  
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