| 一种快速检测非洲猪瘟病毒I177L基因缺失毒株的荧光定量PCR方法 |
| |
| 引用本文： | 邱英武,常昊,彭杰,易和友,王秋梅,郭彦辰,吴倩雯,曹雪珍,林丽苗,李薇,周庆丰,张桂红,李群辉,龚浪.一种快速检测非洲猪瘟病毒I177L基因缺失毒株的荧光定量PCR方法[J].畜牧兽医学报,2023(6):2521-2527. |
| |
| 作者姓名： | 邱英武 常昊 彭杰 易和友 王秋梅 郭彦辰 吴倩雯 曹雪珍 林丽苗 李薇 周庆丰 张桂红 李群辉 龚浪 |
| |
| 作者单位： | 1. 华南农业大学兽医学院非洲猪瘟防控技术研究中心;2. 广东省畜禽健康养殖与环境控制企业重点实验室;3. 国家非洲猪瘟区域实验室(广州);4. 广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室;5. 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心 |
| |
| 基金项目： | 财政部和农业农村部：国家现代农业产业技术体系资助(CARS-35)； |
| |
| 摘 要： | 本研究旨在建立一种特异、灵敏、快速的ASFV-G-ΔI177L实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法。针对ASFV I117L基因的保守区域设计特异性引物/探针对，通过优化反应条件和反应程序，从而提高检测方法的灵敏性，并验证检测方法的重复性和特异性。对170份临床样品进行了检测，并与OIE推荐的检测方法进行对比。结果表明，基于ASFV I117L基因所设计的特异性引物/探针对，能扩增2.2×101～2.2×1010copies·μL-1的pMD18-I177L标准质粒，建立的标准曲线R2可达0.995 7,最低检测模板浓度为2.2×101copies·μL-1;该方法扩增反应采用一步法，耗时35 min,批内、批间变异系数均<1.8%;针对ASFV I177L基因特异性扩增，但对其他5种常见猪病毒核酸样品及无酶水未见阳性扩增；用该方法对170份临床样品进行检测，本方法和OIE推荐的检测方法具有良好的一致性。本研究成功建立了一种特异、灵敏、快速AS...
|
| 关 键 词： | ASF ASFV TaqMan FQ-PCR 分子诊断 |
|
|
