bta-miR-145通过负调控MYO5A参与布莱凯特黑牛骨骼肌发育的机制研究

骨骼肌的发育是畜禽生长过程中的重要阶段,miRNA作为肌肉生成和骨骼肌再生的基本调节因子具有重要作用,本研究旨在探究bta-miR-145参与调控布莱凯特黑牛背最长肌发育的分子机制。采集布莱凯特黑牛和鲁西黄牛背最长肌进行sRNA建库,通过GO功能注释和KEGG富集分析筛选与骨骼肌功能相关的bta-miR-145,生信分析进行保守性分析及预测其靶基因;以布莱凯特黑牛骨骼肌细胞为细胞模型,转染btamiR-145 mimic和inhibitor,48 h后2%马血清诱导并观察分化过程,CCK-8试验和EdU染色法检测细胞增殖率;qRT-PCR检测靶基因MYO5A以及增殖分化标志基因（PCNA、CDK2、Myf5、Myh1）的表达量。结果表明,转染bta-miR-145 mimic可降低布莱凯特黑牛骨骼肌细胞分化（Myf5、Myh1）和增殖（PCNA、CDK2）标记基因的表达（P<0.01）,抑制MYO5A的表达（P<0.01）,转染bta-miR-145 inhibitor则促进骨骼肌细胞分化和增殖标记基因的表达（P<0.05）,促进MYO5A的表达（P<0.01）...