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犬ANP32蛋白多态性及其对A型流感病毒RNA聚合酶活性的影响
引用本文:张媛,于萌萌,孙留克,郭兴,那雷,刘荻萩,姜骞,张海丽,王晓钧.犬ANP32蛋白多态性及其对A型流感病毒RNA聚合酶活性的影响[J].中国畜牧兽医,2022,49(7):2462-2473.
作者姓名:张媛  于萌萌  孙留克  郭兴  那雷  刘荻萩  姜骞  张海丽  王晓钧
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所, 兽医生物技术国家重点实验室, 哈尔滨 150069;2. 吉林大学动物医学学院, 人兽共患病研究教育部重点实验室, 长春 130062
基金项目:国家自然科学基金青年科学基金项目(32002275);黑龙江省自然科学基金优秀青年项目(YQ2020C021)
摘    要:【目的】探索犬酸性核磷蛋白32(canis acidic (leucine-rich) nuclear phosphoprotein 32 ku,caANP32)对不同物种A型流感病毒(Influenza A virus,IAV) RNA 聚合酶活性的影响。【方法】利用实时荧光定量PCR方法分析caANP32家族基因(caANP32A、caANP32B及caANP32E)的组织分布并对其进行扩增和克隆,评估caANP32家族蛋白对不同物种A型流感病毒RNA聚合酶活性的支持作用。【结果】caANP32家族基因在不同组织中分布相似,其中caANP32B基因组织丰度显著或极显著高于caANP32AcaANP32E基因(P<0.05;P<0.01),在心脏、盲肠和大脑中caANP32E基因组织丰度极显著或显著高于caANP32A基因(P<0.01;P<0.05),在肝脏、肺脏等组织中caANP32EcaANP32A基因丰度均无显著差异(P>0.05)。在犬心脏组织和MDCK细胞中发现,caANP32A基因仅存在1个转录本,caANP32B基因存在3个不同剪接变体:caANP32B_X1、caANP32B_X2和caANP32B_X3;caANP32E 基因具有2个不同剪接变体:caANP32E_X1和caANP32E_X2。通过分析ANP32家族蛋白对不同物种A型流感病毒RNA聚合酶活性的影响发现,caANP32A和caANP32B均能支持犬流感病毒(H3N2GD11)和马流感病毒(H3N8JL89)RNA聚合酶活性,而对禽流感病毒(H9N2ZJ12)RNA聚合酶活性支持较低。caANP32B_X2剪接变体对哺乳动物流感病毒RNA聚合酶活性的支持能力显著高于caANP32B_X1和caANP32B_X3(P<0.05);而caANP32E不支持A型流感病毒RNA聚合酶活性。【结论】本研究初步解析了caANP32家族蛋白的组织分布及序列多态性,阐明了其对不同物种A型流感病毒RNA聚合酶活性的支持作用,为解析MDCK细胞作为流感病毒分离和疫苗生产细胞系的分子机制提供了新的借鉴。

关 键 词:A型流感病毒(IAV)  犬酸性核磷蛋白32(caANP32)  MDCK细胞  聚合酶活性  
收稿时间:2021-11-18

Analysis of Canine ANP32 Protein Polymorphism and Effect on RNA Polymerase Activity of Influenza A Virus
ZHANG Yuan,YU Mengmeng,SUN Liuke,GUO Xing,NA Lei,LIU Diqiu,JIANG Qian,ZHANG Haili,WANG Xiaojun.Analysis of Canine ANP32 Protein Polymorphism and Effect on RNA Polymerase Activity of Influenza A Virus[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2022,49(7):2462-2473.
Authors:ZHANG Yuan  YU Mengmeng  SUN Liuke  GUO Xing  NA Lei  LIU Diqiu  JIANG Qian  ZHANG Haili  WANG Xiaojun
Institution:1. State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150069, China;2. Key Laboratory of Zoonosis Research, Ministry of Education, Institute of Zoonosis, College of Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China
Abstract:
Keywords:Influenza A virus (IAV)  caANP32  MDCK cells  polymerase activity  
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