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柑橘抗溃疡病转录因子CsAP2-09互作蛋白筛选与分析
引用本文:
祁静静,窦万福,张庆雯,胡安华,陈善春,雷天刚,彭爱红,许兰珍,姚利晓,何永睿,李 强.柑橘抗溃疡病转录因子CsAP2-09互作蛋白筛选与分析[J].园艺学报,2020,47(3):432-444.
作者姓名:
祁静静
窦万福
张庆雯
胡安华
陈善春
雷天刚
彭爱红
许兰珍
姚利晓
何永睿
李 强
作者单位:
西南大学/中国农业科学院柑桔研究所,国家柑桔工程技术研究中心,重庆 400712
基金项目:
国家重点研发计划项目(2018YFD1000300);中央高校基本科研业务费项目(SWU115025);广西科技重大专项(桂科AA18118046-6);国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-26);重庆市社会事业与民生体系保障科技创新专项(cstc2016shms-ztzx80001,cstc2017shms-xdny80051)
摘 要:
以前期获得的柑橘抗溃疡病的正调控转录因子基因 CsAP2-09 超表达植株为材料,利用 GST融合蛋白沉降技术(GST pull-down)联合液相色谱串联质谱(LC–MS/MS)方法筛选并鉴定 CsAP2-09的互作蛋白。首先原核表达并纯化 GST-CsAP2-09 作为诱饵蛋白,然后与 CsAP2-09 超表达植株叶片总蛋白孵育、洗脱后进行 SDS-PAGE 验证,最后进行 LC–MS/MS 鉴定。得到 17 个互作蛋白,将蛋白进行注释、GO 分析、KEGG 分析,发现其中 5 个可能与植物抗病相关(如过氧化氢酶 Cs3g27280)。构建这 17个蛋白的互作网络,其中 14 个蛋白的互作关系得到已有数据的支持。对 CsAP2-09 与互作蛋白的共表达分析发现 CsAP2-09 超表达引起了 16 个蛋白表达上调和 1 个蛋白表达下调。
关 键 词:
柑橘
柑橘溃疡病
GST
pull-down
CsAP2-09
AP2/ERF
互作蛋白
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