牛病毒性腹泻病毒一步 RT-LAMP快速检测方法的建立 |
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引用本文: | 袁万哲,王腾,王建昌,李丽敏,张秀媛,孙继国.牛病毒性腹泻病毒一步 RT-LAMP快速检测方法的建立[J].农业科学与技术,2014(10):1826-1829. |
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作者姓名: | 袁万哲 王腾 王建昌 李丽敏 张秀媛 孙继国 |
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作者单位: | 1. 河北农业大学动物医学院,河北保定 071001; 河北省兽医生物技术工程技术研究中心,河北保定 071001; 农业部动物疫病病原生物学华北区观测实验站,河北保定 071001 2. 河北省出入境检验检疫局技术中心,河北石家庄,050000 |
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基金项目: | We thank Dr Qiufeng Li and Yanxia Gao (College of Animal Sci- ence and Technoloy, Agricultural Uni- versity of Hebei) for collecting fecal samples from calves with diarrhea. |
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摘 要: | 目的]建立一种快速、敏感、特异的检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)方法,为诊断与监测BVDV 提供准确可靠工具。方法]根据GenBank公布的BVDV序列,在其保守序列区域设计了一套 LAMP引物,优化了反应时间与反应温度,建立了检测 BVDV的 RT-LAMP方法。结果]该方法能在56℃等温条件下40分钟完成扩增,扩增结果可通过凝胶电泳梯形带判定。该方法具有良好的特异性和敏感性,最低能检测到3.74×100 copies/μl的病毒 RNA,而且与其他病毒无交叉反应。结论]该方法能用于牛病毒性腹泻病毒的诊断与监测。
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关 键 词: | 牛病毒性腹泻病毒 RT—LAMP 检测 |
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