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红螯光壳螯虾细胞自噬过程中自噬体与微管相互作用
引用本文:孟凡娟,张广成,尹文娟,王丽燕,孙金生.红螯光壳螯虾细胞自噬过程中自噬体与微管相互作用[J].水产学报,2019,43(12):2494-2500.
作者姓名:孟凡娟  张广成  尹文娟  王丽燕  孙金生
作者单位:天津师范大学生命科学学院, 天津市动植物抗性重点实验室, 天津 300387,天津师范大学生命科学学院, 天津市动植物抗性重点实验室, 天津 300387,天津师范大学生命科学学院, 天津市动植物抗性重点实验室, 天津 300387,天津师范大学生命科学学院, 天津市动植物抗性重点实验室, 天津 300387,天津师范大学生命科学学院, 天津市动植物抗性重点实验室, 天津 300387
基金项目:天津市自然科学基金(17JCYBJC29700);国家自然科学基金(31472299)
摘    要:昆虫方面研究提示自噬在病毒侵染增殖中发挥了重要作用,而虾类自噬研究报道极少,了解虾类细胞自噬将为虾病害免疫研究开辟新的思路。自噬相关蛋白LC3是自噬过程的标志性蛋白,存在于自噬体膜上,前期生物信息学分析发现,红螯光壳螯虾自噬相关蛋白LC3(CqLC3)和微管蛋白α-tubulin (Cqα-tubulin)具有互作关系。为深入揭示红螯光壳螯虾细胞自噬体的运输途径,本实验通过体外重组构建了蛋白表达载体pET-HISCqLC3和pET-GST-Cqα-tubulin,并诱导表达,利用亲和层析法分别纯化获得HIS和GST融合表达蛋白HIS-CqLC3和GST-Cqα-tubulin,利用GST pull-down实验验证发现,CqLC3与Cqα-tubulin存在相互作用。微管抑制剂长春新碱解聚微管后,利用MDC染色法检测自噬体发现,红螯光壳螯虾细胞微管解聚破坏后自噬体积累增多,细胞不能正常完成自噬反应,因此可知,红螯光壳螯虾细胞自噬体可通过CqLC3与微管相互作用,微管在红螯光壳螯虾细胞自噬过程中对自噬体的运输具有重要作用。本文首次揭示了虾类细胞自噬反应中自噬体的运输途径,研究结果为虾类细胞自噬的研究奠定了基础。

关 键 词:红螯光壳螯虾  自噬  自噬体  微管  微管蛋白
收稿时间:2018/8/13 0:00:00
修稿时间:2019/1/4 0:00:00

Study on interaction of autophagosome and microtubule during autophagy process in Cherax quadricarinatus
MENG Fanjuan,ZHANG Guangcheng,YIN Wenjuan,WANG Liyan and SUN Jinsheng.Study on interaction of autophagosome and microtubule during autophagy process in Cherax quadricarinatus[J].Journal of Fisheries of China,2019,43(12):2494-2500.
Authors:MENG Fanjuan  ZHANG Guangcheng  YIN Wenjuan  WANG Liyan and SUN Jinsheng
Institution:Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance, College of Life Science, Tianjin Normal University, Tianjin 300387, China,Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance, College of Life Science, Tianjin Normal University, Tianjin 300387, China,Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance, College of Life Science, Tianjin Normal University, Tianjin 300387, China,Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance, College of Life Science, Tianjin Normal University, Tianjin 300387, China and Tianjin Key Laboratory of Animal and Plant Resistance, College of Life Science, Tianjin Normal University, Tianjin 300387, China
Abstract:
Keywords:shrimp  autophagy  autophagosome  microtubule  tubulin
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