| 马梨形虫病病原双重荧光PCR快速检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 高志强,汪琳,尹羿,张伟,蒲静,赵相鹏,任彤. 马梨形虫病病原双重荧光PCR快速检测方法的建立与应用[J]. 中国动物检疫, 2019, 36(10): 90-97 |
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| 作者姓名： | 高志强 汪琳 尹羿 张伟 蒲静 赵相鹏 任彤 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目（2017YFF0210305） |
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| 摘 要： | 在序列比对分析的基础上，设计2对引物和2条MGB探针，经体系优化建立了可快速鉴别检测两种马梨形虫病病原（马泰勒虫和驽巴贝斯虫）的双重荧光PCR检测方法。该方法可分别检出22和31基因拷贝的虫体DNA，且不与其他马病病原发生交叉反应。应用建立的荧光PCR检测方法，对采自进出口马匹的10份马全血和20份马血清进行检测，结果从马全血中检出2份马泰勒虫阳性样品。使用一对马泰勒虫EMA1全基因扩增引物，从2份阳性样品中扩增了EMA1基因。克隆测序后，对该基因全序列进行分析，证实其为马泰勒虫特异基因序列；2份样品的基因序列相似性为98.9%，存在6个氨基酸变异；2个样品中的EMA1基因不完全一致，表明2个感染样品中的虫体可能为不同的马泰勒虫虫株。
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| 关 键 词： | 马梨形虫病；双重荧光PCR；马泰勒虫；驽巴贝斯虫；检测与应用 |
Establishment and Application of a Duplex Real-time PCR Method for Detection of Piroplasmosis Disease |
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| Gao Zhiqiang,Wang Lin,Yin Yi,Zhang Wei,Pu Jing,Zhao Xiangpeng,Ren Tong. Establishment and Application of a Duplex Real-time PCR Method for Detection of Piroplasmosis Disease[J]. China Animal Health Inspection, 2019, 36(10): 90-97 |
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| Authors: | Gao Zhiqiang Wang Lin Yin Yi Zhang Wei Pu Jing Zhao Xiangpeng Ren Tong |
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