电击法转化金针菇菌丝碎片表达报告基因eGFP及GUS的研究 |
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引用本文: | 刘建雨,张美彦,张丹,徐珍,宋春艳,李巧珍,尚晓冬,谭琦,黄志勇,胡卫红,张引芳,赵静,王瑞娟.电击法转化金针菇菌丝碎片表达报告基因eGFP及GUS的研究[J].食用菌学报,2018(2). |
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作者姓名: | 刘建雨 张美彦 张丹 徐珍 宋春艳 李巧珍 尚晓冬 谭琦 黄志勇 胡卫红 张引芳 赵静 王瑞娟 |
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作者单位: | 上海市农业科学院食用菌研究所农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室;上海雪榕生物科技股份有限公司;上海光明森源生物科技有限公司 |
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摘 要: | 以不完全酶解的金针菇(Flammulina velutipes)菌丝碎片作为转化受体,通过电击转化法将载体pYN6981导入金针菇单核体Dan3基因组中。结果显示:在复筛培养基上生长良好的转化子,其基因组中可扩增出潮霉素基因片段,通过激光共聚焦显微镜可观察到绿色荧光,GUS组织染色显示为蓝色,说明目的载体已经成功插入金针菇基因组中并获得表达。转化效率达16个转化子每10~6个菌丝碎片。有丝分裂稳定性分析显示80%的转化子可以稳定遗传。
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