| Lyz-GFP双元基因在苜蓿愈伤组织中的转化 |
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| 引用本文： | 韩斌,马晖玲,李云霞.Lyz-GFP双元基因在苜蓿愈伤组织中的转化[J].草地学报,2010,18(3):352-357. |
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| 作者姓名： | 韩斌 马晖玲 李云霞 |
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| 作者单位： | 甘肃农业大学草业学院,甘肃,兰州,730070;草业生态系统教育部重点实验室,甘肃,兰州,730070;中-美草地畜牧业可持续研究中心,甘肃,兰州,730070;甘肃农业大学草业学院,甘肃,兰州,730070;草业生态系统教育部重点实验室,甘肃,兰州,730070;中-美草地畜牧业可持续研究中心,甘肃,兰州,730070;甘肃农业大学草业学院,甘肃,兰州,730070;草业生态系统教育部重点实验室,甘肃,兰州,730070;中-美草地畜牧业可持续研究中心,甘肃,兰州,730070 |
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| 基金项目： | 甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目，国家科技支撑计划 |
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| 摘 要： | 利用农杆菌介导法将溶菌酶(Lyz)与绿色荧光蛋白(GFP)基因转入"甘农1号"杂花苜蓿(Medicago sativa Martyn)和"甘农3号"紫花苜蓿(Medicago sativa L.)品种中,获得含有该双元基因的苜蓿转基因愈伤组织;采用荧光检测和PCR扩增技术,检测到溶菌酶Lyz和绿色荧光蛋白GFP基因在苜蓿愈伤细胞中的表达;研究该双元基因在苜蓿品种"甘农1号"和"甘农3号"中转化的若干影响因素,确定适宜的转化条件以期提高基因转化效率.结果表明:75 mg·L-1的卡那霉素对苜蓿愈伤组织的生长具有显著抑制效应;300 mg·L-1头孢霉素能够有效地抑制农杆菌LBA4404的生长;OD600值为0.4～0.5的农杆菌适宜的侵染时间是10 min;经预培养3～4 d的材料侵染后再共培养3 d之后,在愈伤组织诱导培养基MS+2,4-D 2.0 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1+0.6%琼脂+2.5%蔗糖的培养基上诱导出抗性愈伤组织;"甘农1号"和"甘农3号"的抗性愈伤组织诱导率分别为35%和32%.
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| 关 键 词： | 苜蓿 溶菌酶Lyz基因 绿色荧光蛋白GFP基因 愈伤组织 农杆菌介导 |
Lysozyme-GFP Dual Gene in the Transformation in Callus of Alfalfa |
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| Han Bin,MA Hui-ling,Li Yun-Xia.Lysozyme-GFP Dual Gene in the Transformation in Callus of Alfalfa[J].Acta Agrestia Sinica,2010,18(3):352-357. |
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| Authors: | Han Bin MA Hui-ling Li Yun-Xia |
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