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| 结核分枝杆菌酯酶Rv1400c原核表达及表达产物的酶活性分析 | |
| 引用本文： | 陶荣珊,李金伟,刘思国,王全凯.结核分枝杆菌酯酶Rv1400c原核表达及表达产物的酶活性分析[J].吉林农业大学学报,2014(6). |
| 作者姓名： | 陶荣珊 李金伟 刘思国 王全凯 |
| 作者单位： | 1. 吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118; 吉林省中韩动物科学研究院，长春130600 2. 吉林东丰药业股份有限公司,东丰,136300 3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室,哈尔滨,150001 |
| 基金项目： | 国家国际科技合作专项，国家自然科学基金项目，国家重点基础研究发展计划项目[973计划(2012CB518801)]，长春市科技局项目 |
| 摘 要： | 为探究结核分枝杆菌酯酶Rv1400c活性,以进一步研究Rv1400c的结构和功能。以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,对Rv1400c基因进行扩增,并将其克隆到p ET28b(+)原核表达载体上,构建p ET28b-Rv1400c重组质粒,然后将构建的重组质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,增菌后用IPTG进行诱导表达再用亲和层吸树脂法进行纯化,利用不同底物、不同p H、不同温度对纯化后的Rv1400c酯酶进行活性分析。结果表明:成功构建出p ET28b-Rv1400c重组质粒;SDS-PAGE和Western blot显示,Rv1400c以包涵体形式表达,蛋白分子质量为39 ku;在对8种底物的筛选中发现Rv1400c在C2~C14中具有活性,其中以在C2中活性最好;在以C12为底物、p H 8.0、37℃条件下酯酶活性最高。 |
| 关 键 词： | 结核分枝杆菌酯酶Rv1400c pET28b-Rv1400c重组质粒 包涵体 酯酶活性 |
Prokaryotic Expression of Esterase Rv1400c from Mycobacterium tu-berculosis and Determination of Expressed Product Enzyme Activity |
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| TAO Rongshan,LI Jinwei,LIU Siguo,WANG Quankai.Prokaryotic Expression of Esterase Rv1400c from Mycobacterium tu-berculosis and Determination of Expressed Product Enzyme Activity[J].Journal of Jilin Agricultural University,2014(6). | |
| Authors: | TAO Rongshan LI Jinwei LIU Siguo WANG Quankai |
| Abstract: | |
| Keywords: | esterase Rv1400c of Mycobacterium tuberculosis recombinant plasmid of pET28b-Rv1400c inclusion body esterase activity |
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