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犬瘟热病毒OP株囊膜糖蛋白H基因的克隆与表达
引用本文:徐向明,崔治中,徐建生,秦爱建,殷俊,杨玲,陈璐,宗卫峰,李厚达. 犬瘟热病毒OP株囊膜糖蛋白H基因的克隆与表达[J]. 中国预防兽医学报, 2002, 24(6): 436-439
作者姓名:徐向明  崔治中  徐建生  秦爱建  殷俊  杨玲  陈璐  宗卫峰  李厚达
作者单位:1. 扬州大学畜牧兽医学院,江苏,扬州,225009
2. 山东农业大学动物科技学院,山东,泰安,271018
摘    要:
根据发表的犬瘟热病毒OP-CDV毒株序列设计两对引物,以犬瘟热病毒OP-CDV株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板,做RT-PCR扩增出H基因的5'端和3' 端大小为945bp、904bp的两个片段,两片段部分重叠,覆盖了H基因的全部编码序列。将PCR产物按正确的阅读框架定向克隆进pGEX-6P-1载体中谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因的下游,将重组质粒转化进宿主菌BL21中,在37℃ 1.0mM IRTG诱导下,H基因分段获得了良好的表达,表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,确定其表达的融合蛋白质大小分别为59kDa、58kDa,将表达产物回收后混合免疫小鼠。IFA显示免疫小鼠血清能与病毒感染细胞呈现特异反应,表明体外表达H基因保留了天然蛋白部分抗原性。

关 键 词:OP株 囊膜糖蛋白H基因 犬瘟热病毒 间接免疫荧光 基因克隆 基因表达
文章编号:1008-0589(2002)06-0436-04
修稿时间:2001-12-10

Clone and Expression of Canine Distemper Virus Haemagglutinin(H)Protein Gene
XU Xiang_ming ,CUI Zhi_zhong ,XU Jian_sheng ,QIN Ai_jian ,YIN Jun ,YANG Ling ,CHEN Lu ,ZONG Wei_feng ,LI Hou-da ). Clone and Expression of Canine Distemper Virus Haemagglutinin(H)Protein Gene[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2002, 24(6): 436-439
Authors:XU Xiang_ming   CUI Zhi_zhong   XU Jian_sheng   QIN Ai_jian   YIN Jun   YANG Ling   CHEN Lu   ZONG Wei_feng   LI Hou-da )
Affiliation:XU Xiang_ming 1,CUI Zhi_zhong 2,XU Jian_sheng 1,QIN Ai_jian 1,YIN Jun 1,YANG Ling 1,CHEN Lu 1,ZONG Wei_feng 1,LI Hou-da 1)
Abstract:
Keywords:Canine distemper virus  H gene  Expression  IFA
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