| CBM2蛋白的高密度自诱导 |
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| 引用本文： | 马闪闪,韩来闯,刘亚娟,刘 猛,刘亮伟.CBM2蛋白的高密度自诱导[J].中国农学通报,2015,31(18):140-145. |
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| 作者姓名： | 马闪闪 韩来闯 刘亚娟 刘 猛 刘亮伟 |
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| 作者单位： | 河南农业大学生命科学学院,河南农业大学生命科学学院,河南农业大学生命科学学院,河南农业大学生命科学学院,河南农业大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 基金项目：国家自然科学基金“基于结构分析的嗜热CBM拆分-易位-组合融合对木聚糖酶稳定性-活性影响”(31371831)；“基于pH相关氨基酸定位分析的双功能木聚糖酶耐酸性突变研究”(30972123)。 |
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| 摘 要： | 为提高外源蛋白表达量,以pET20b载体、BL21(DE3)E.coli宿主细胞,比较了乳糖和IPTG对CBM2(碳水化合物结合结构域)蛋白表达量的诱导效果。ZYM-5052自诱导培养基菌体OD600是IPTG LB培养基菌体的4.4倍。SDS-PAGE显示200μL ZYM-5052菌体细胞含有82.3μg CBM2,占细胞总蛋白55.3%;等量IPTG LB菌体细胞含有16.6μg CBM2,占细胞总蛋白25.7%。取不同培养时间等量等同OD600的ZYM-5052菌体进行SDS-PAGE,结果显示单位细胞中蛋白量随着培养时间而增加。所以高密度自诱导不仅提高了细胞生长密度、而且提高了单位细胞中蛋白表达量。自诱导方案用于表达葡聚糖酶,与IPTG LB菌体相比,自诱导菌体OD600是其2.3倍,酶活性是其4.5倍。该研究为提高外源蛋白表达量提供了较为简单、普适的高密度自诱导方案。
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| 关 键 词： | CBM2 高密度 自诱导 |
| 收稿时间： | 2015/2/26 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2015/6/11 0:00:00 |
High Density Self-induction of CBM2 |
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| Ma Shanshan,Han Laichuang,Liu Yajuan,Liu Meng and Liu Liangwei.High Density Self-induction of CBM2[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2015,31(18):140-145. |
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| Authors: | Ma Shanshan Han Laichuang Liu Yajuan Liu Meng and Liu Liangwei |
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| Institution: | College of Life Science, Henan Agricultural University,College of Life Science, Henan Agricultural University,College of Life Science, Henan Agricultural University,College of Life Science, Henan Agricultural University,College of Life Science, Henan Agricultural University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CBM2 high density self-inducing |
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