4种猪腹泻病毒恒温隔绝式荧光RT-PCR检测方法的建立及应用 |
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引用本文: | 侯闻闻,余良政,樊毛迪,朱振邦,林成贤,陈昌海,李向东.4种猪腹泻病毒恒温隔绝式荧光RT-PCR检测方法的建立及应用[J].畜牧与兽医,2023(9):83-88. |
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作者姓名: | 侯闻闻 余良政 樊毛迪 朱振邦 林成贤 陈昌海 李向东 |
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作者单位: | 1. 扬州大学兽医学院;2. 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;3. 扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室;4. 金瑞鸿捷(厦门)生物科技有限公司;5. 江苏省动物疫病预防控制中心 |
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基金项目: | 江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(21)2014];;江苏现代农业产业体系建设项目(JATS[2022]361); |
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摘 要: | 为鉴别猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)这4种猪主要腹泻病毒,本研究分别针对PEDV M基因、TGEV M基因、PoRV NSP5基因、PDCoV M基因设计特异性引物和探针,经过方阵法优化恒温隔绝式荧光RT-PCR(iiRT-PCR)反应条件,建立了检测这4种猪腹泻病毒iiRT-PCR方法。用建立的iiRT-PCR方法分别检测PEDV、TGEV、PoRV、PDCoV、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、日本脑炎病毒(JEV),并对iiRT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果显示该方法特异性强,对PEDV、TGEV、PoRV、PDCoV的检测下限分别为102、102、103、103 TCID50/mL,并具有良好的组内和组间重复性;而荧光定量PCR方法的检测下限分别为101、102、102、102<...
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关 键 词: | 猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪轮状病毒 猪德尔塔冠状病毒 恒温隔绝式荧光RT-PCR |
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