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4种猪腹泻病毒恒温隔绝式荧光RT-PCR检测方法的建立及应用
引用本文:侯闻闻,余良政,樊毛迪,朱振邦,林成贤,陈昌海,李向东.4种猪腹泻病毒恒温隔绝式荧光RT-PCR检测方法的建立及应用[J].畜牧与兽医,2023(9):83-88.
作者姓名:侯闻闻  余良政  樊毛迪  朱振邦  林成贤  陈昌海  李向东
作者单位:1. 扬州大学兽医学院;2. 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;3. 扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室;4. 金瑞鸿捷(厦门)生物科技有限公司;5. 江苏省动物疫病预防控制中心
基金项目:江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(21)2014];;江苏现代农业产业体系建设项目(JATS[2022]361);
摘    要:为鉴别猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)这4种猪主要腹泻病毒,本研究分别针对PEDV M基因、TGEV M基因、PoRV NSP5基因、PDCoV M基因设计特异性引物和探针,经过方阵法优化恒温隔绝式荧光RT-PCR(iiRT-PCR)反应条件,建立了检测这4种猪腹泻病毒iiRT-PCR方法。用建立的iiRT-PCR方法分别检测PEDV、TGEV、PoRV、PDCoV、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、日本脑炎病毒(JEV),并对iiRT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果显示该方法特异性强,对PEDV、TGEV、PoRV、PDCoV的检测下限分别为102、102、103、103 TCID50/mL,并具有良好的组内和组间重复性;而荧光定量PCR方法的检测下限分别为101、102、102、102<...

关 键 词:猪流行性腹泻病毒  猪传染性胃肠炎病毒  猪轮状病毒  猪德尔塔冠状病毒  恒温隔绝式荧光RT-PCR
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