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斯氏副柔线虫GP基因的克隆、抗原表位预测及生物信息学分析
引用本文:赵学亮,王梦雅,孙柯,冯陈晨,王文龙.斯氏副柔线虫GP基因的克隆、抗原表位预测及生物信息学分析[J].中国畜牧兽医,2018,45(6):1645-1652.
作者姓名:赵学亮  王梦雅  孙柯  冯陈晨  王文龙
作者单位:1. 内蒙古农业大学兽医学院, 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室, 呼和浩特 010018;
2. 内蒙古农业大学动物科学学院, 呼和浩特 010018
基金项目:国家自然科学基金项目(31260603);内蒙古自然科学基金项目(2016MS0341);内蒙古自治区研究生科研创新资助项目(S20171012913)
摘    要:试验旨在克隆斯氏副柔线虫糖蛋白(glycoprotein,GP)抗原基因,并对其进行生物信息学分析。提取斯氏副柔线虫组织RNA,反转录合成cDNA,设计特异性引物以扩增GP基因CDS区,同时将其插入到克隆载体pMD19-T后测序,并对该基因编码蛋白的抗原表位、理化性质、信号肽、跨膜结构域等进行生物信息学预测。结果表明,GP基因开放阅读框(ORF)全长1 149 bp,编码382个氨基酸,其分子式为C1760H2878N458O590S1760,理论分子质量约为40.15 ku,等电点为4.37,无信号肽,总平均亲水性为0.032,不稳定系数为42.43,是疏水、不稳定蛋白;其磷酸化位点分布位于丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)和酪氨酸(Tyr)残基上;二级结构分析显示,斯氏副柔线虫GP蛋白以α-螺旋和无规则卷曲为主,与三级结构预测结果一致;抗原表位预测表明,GP蛋白可能有6个B细胞抗原表位和8个T细胞抗原表位,有望用作免疫诊断抗原和疫苗候选抗原。本研究成功克隆了斯氏副柔线虫GP基因,同时进行了系统的生物信息学分析和抗原表位预测,为斯氏副柔线虫病iELISA诊断方法的建立和DNA疫苗的研究提供理论依据。

关 键 词:斯氏副柔线虫  GP基因  抗原表位  生物信息学  
收稿时间:2017-12-29

Cloning,Prediction of Epitopes and Bioinformatic Analysis of GP Gene in Parabronema skrjabini
ZHAO Xueliang,WANG Mengya,SUN Ke,FENG Chenchen,WANG Wenlong.Cloning,Prediction of Epitopes and Bioinformatic Analysis of GP Gene in Parabronema skrjabini[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2018,45(6):1645-1652.
Authors:ZHAO Xueliang  WANG Mengya  SUN Ke  FENG Chenchen  WANG Wenlong
Institution:1. Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease, Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China;
2. College of Animal Science, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China
Abstract:
Keywords:Parabronema skrjabini  GP gene  antigen epitopes  bioinformatics  
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