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盐胁迫应答基因GmWRKY6的克隆及转基因百脉根的抗盐分析
引用本文:柯丹霞,彭昆鹏,夏远君,朱玉莹,张丹丹.盐胁迫应答基因GmWRKY6的克隆及转基因百脉根的抗盐分析[J].草业学报,2018,27(8):95-106.
作者姓名:柯丹霞  彭昆鹏  夏远君  朱玉莹  张丹丹
作者单位:信阳师范学院生命科学学院,大别山农业生物资源保护与利用研究院,河南 信阳 464000
基金项目:国家自然科学基金项目(31400213),河南省科技攻关计划项目(182102110448),信阳师范学院青年骨干教师资助计划(2015)和信阳师范学院“南湖学者奖励计划”青年项目(2016)资助
摘    要:根据大豆盐胁迫RNA-Seq数据,筛选并克隆得到1个大豆WRKY类转录因子GmWRKY6基因。序列分析表明,该基因含有1 个1674 bp的开放阅读框,编码557 个AA,编码蛋白属于IIb 类WRKY 家族成员,含有1个WRKY 保守结构域和1个C2H2锌指结构基序。基因表达模式分析表明,GmWRKY6基因在大豆根中表达量较高,并且该基因受盐胁迫诱导表达。构建GmWRKY6基因的植物超表达载体,获得7株T0代阳性转GmWRKY6基因百脉根。进一步对T1代转基因株系进行抗盐分析发现,在200 mmol·L-1 NaCl 处理14 d后转基因株系生长状态良好,而野生型对照生长矮小,叶片干枯。此外,对相关生理指标的测定发现,转基因株系叶片中脯氨酸和叶绿素含量显著高于野生型对照,而丙二醛含量和相对质膜透性显著低于野生型对照。此外,盐胁迫下转基因百脉根叶片中钠离子含量显著低于对照,而钾离子含量显著高于对照。以上结果表明大豆GmWRKY6基因的超表达能够显著增强百脉根的抗盐能力。

关 键 词:大豆  WRKY转录因子  子叶节转化  百脉根  耐盐性  
收稿时间:2017-12-20
修稿时间:2018-03-19

Cloning of salt-stressed responsive gene GmWRKY6 and salt resistance analysis of transgenic Lotus japonicus
KE Dan-xia,PENG Kun-peng,XIA Yuan-jun,ZHU Yu-ying,ZHANG Dan-dan.Cloning of salt-stressed responsive gene GmWRKY6 and salt resistance analysis of transgenic Lotus japonicus[J].Acta Prataculturae Sinica,2018,27(8):95-106.
Authors:KE Dan-xia  PENG Kun-peng  XIA Yuan-jun  ZHU Yu-ying  ZHANG Dan-dan
Institution:College of Life Sciences, Xinyang Normal University, Institute for Conservation and Utilization of Agro-bioresources in Dabie Mountains, Xinyang 464000, China
Abstract:
Keywords:
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