| 黑曲霉内切β-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的高效表达 |
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| 引用本文： | 黄君,张昌毅,赵述淼,梁运祥.黑曲霉内切β-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的高效表达[J].华中农业大学学报,2008,27(5). |
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| 作者姓名： | 黄君 张昌毅 赵述淼 梁运祥 |
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| 作者单位： | 华中农业大学生命科学技术学院/农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070 |
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| 摘 要： | 利用RT-PCR技术,提取黑曲霉(Aspergillus niger)L3的总RNA进行反转录,并通过PCR扩增得到去除天然信号肽的β-1,4-葡聚糖酶基因eg Ⅰ,将其插入到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,使之位于α-因子信号肽下游,并与之同框,构建重组表达质粒pPIC9k-eg Ⅰ,电击转化毕赤酵母GS115,经MM、MD、CMC-Na和G418平板筛选,得到重组毕赤酵母工程菌1#和5#,在摇瓶中β-1,4-葡聚糖酶酶活分别达到1456 U/mL和1928U/mL.重组酶最适温度为70℃,最适pH为5.0.
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| 关 键 词： | 黑曲霉 β-1 4-内切葡聚糖酶 毕赤酵母 表达 |
Highly Effective Expression of Aspergillus niger Endo-β-1,4-glucanase in Pichia pastoris |
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| HUANG Jun ZHANG Chang-yi ZHAO Shu-miao LIANG Yun-xiang.Highly Effective Expression of Aspergillus niger Endo-β-1,4-glucanase in Pichia pastoris[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2008,27(5). |
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| Authors: | HUANG Jun ZHANG Chang-yi ZHAO Shu-miao LIANG Yun-xiang |
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| Institution: | College of Life Science and Technology/ State Key Laboratory of Agricultural Microbiology;Huazhong Agricultural University;Wuhan 430070;China |
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