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猪带绦虫六钩蚴cDNA文库的构建与筛选
引用本文:唐雨德,陆承平.猪带绦虫六钩蚴cDNA文库的构建与筛选[J].中国兽医学报,2003,23(6):567-569.
作者姓名:唐雨德  陆承平
作者单位:1. 南京军区军事医学研究所,江苏,南京,210002
2. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095
摘    要:在体外将猪带绦虫虫卵孵化为有活力的六钩蚴。采用商品化试剂盒抽提六钩蚴总 RNA、m RNA,反转录为双链c DNA,再加 Eco R Adapter。在去除小片段后 ,dsc DNA与 λgt11噬菌体 DNA连接 ,经蛋白包装 ,构建了猪带绦虫六钩蚴λgt11c DNA文库。该文库效价为 3.5× 10 9pfu/ m L ,重组 DNA片段大小为 0 .5~ 3.2 kb,平均为 1.6 kb,蓝白斑比 1∶ 9。用抗体探针对文库进行免疫学筛选 ,在消除非特异性反应的基础上筛选约 10 6 重组子 ,共得到 118株强阳性克隆 ;应用 PCR鉴定上述部分阳性克隆 ,均扩增到 0 .5 kb以上的片段。结果显示 ,构建的文库合格 ,含六钩蚴所有抗原基因 ,可用于六钩蚴 c DNA克隆的筛选 ;用免疫学与 PCR联合筛选 c DNA文库 ,可消除假阳性

关 键 词:猪带绦虫  六钩蚴  cDNA文库  囊虫病  免疫  抗原  筛选
文章编号:1005-4545(2003)06-0567-03
修稿时间:2002年11月19

Construction and Screening of a cDNA library of Taenia solium on cospheres
TANG Yu de ,LU Cheng ping.Construction and Screening of a cDNA library of Taenia solium on cospheres[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2003,23(6):567-569.
Authors:TANG Yu de  LU Cheng ping
Institution:TANG Yu de 1,LU Cheng ping 2
Abstract:
Keywords:Taenia solium  oncosphere  the cDNA library  screening
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