| 草鱼呼肠孤病毒衣壳蛋白靶向灭活转基因P0的构建 |
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| 作者姓名： | 秦波 程洛单 陈杰 蒋霞云 邹曙明 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306 |
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| 基金项目： | 国家“八六三”高技术研究发展计划(2011AA100403);国家自然科学基金(31272633,31201760);上海高校知识服务平台(ZF1206) |
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| 摘 要： | 为探索草鱼出血病防治新技术,实验采用衣壳蛋白靶向灭活(capsid-targeted viral inactivation,CTVI)策略,利用Tgf2转座子元件,构建了带爪蟾EF1α或鲤热休克蛋白70两种不同启动子的CTVI转基因质粒p Tgf2-EF1α-VP3-SN或p Tgf2-Hsp70-VP3-SN。该2种质粒均包含GCRV衣壳蛋白VP3与金黄色葡萄球菌核酸酶(Staphylococcus aureus nuclease,SN)融合表达阅读框。通过将2种CTVI转基因质粒与体外合成的Tgf2转座酶5'加帽mRNA共同显微注射入草鱼1~2细胞期受精卵,获得了带2种不同启动子的CTVI转基因草鱼群体。PCR和测序结果显示,2种转基因阳性草鱼基因组中均含有外源GCRV衣壳蛋白VP3与SN基因片段,阳性率分别为40.2%和37.0%,表明Tgf2转座子已成功介导CTVI融合表达基因整合到草鱼基因组中。本实验共获得了120尾P0CTVI转基因个体,为将来构建抗出血病草鱼新品系奠定了基础材料。
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| 关 键 词： | 草鱼 草鱼出血病 呼肠孤病毒 衣壳蛋白靶向灭活 转基因 |
| 收稿时间： | 2014-07-22 |
| 修稿时间： | 2014-10-17 |
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