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大肠杆菌K88纤毛抗原的提纯和抗血清的制备
引用本文:李虹,朱良全,刘亚华,范书才.大肠杆菌K88纤毛抗原的提纯和抗血清的制备[J].中国兽药杂志,2006,40(12):23-26,14.
作者姓名:李虹  朱良全  刘亚华  范书才
作者单位:1. 中国兽医药品监察所,北京,100081
2. 乾元浩生物股份有限公司南京生物药厂,南京,210012
摘    要:以5%绵羊血改良Minca琼脂筛选和克隆表达良好的K88^+菌株,改良Minca琼脂培养获得K88菌液。用加热法及高速匀浆法使K88纤毛从菌体上脱下。饱和硫酸铵沉淀粗提,用Sepharose CL-4B凝胶过滤纯化K88抗原。提纯的抗原经SDS—PAGE电泳测定其分子量约为25000,且仅此一条蛋白带;与K88抗血清进行琼脂扩散试验只出现一条沉淀线。用提纯的抗原经多次免疫家兔制备了K88抗血清。抗血清在玻板凝集试验中只凝集K88菌株,不凝集K99,987P或F41菌株;在琼扩试验中,只与K88粗提抗原出现一条沉淀线,且效价为1:64,而不与K99,987P抗原出现沉淀线;在免疫电泳试验中,与无细胞K88纤毛液只出现一条沉淀线。鉴定结果表明,所制备的K88血清特异性强、效价高,可作为单因子血清用于凝集试验、琼扩试验等血清学试验,对K88菌株进行鉴定,对K88纤毛抗原进行定性和定量检测。

关 键 词:大肠杆菌  K88纤毛抗原  K88抗血清
文章编号:1002-1280(2006)12-0023-05
收稿时间:2006-09-09
修稿时间:2006-09-09

Purification of K88 Pilus Antigen of the Escherichia coli and Preparation of the Antiserum
LI Hong,ZHU Liang-quan,LIU Ya-hua,FAN Shu-cai.Purification of K88 Pilus Antigen of the Escherichia coli and Preparation of the Antiserum[J].Chinese Journal of Veterinary Drug,2006,40(12):23-26,14.
Authors:LI Hong  ZHU Liang-quan  LIU Ya-hua  FAN Shu-cai
Institution:1 China Institute of Veternary Drug Control, Beijing 100081 ; 2. Nanjing Biological Manufactory, Qian YuanHao Biological Co. , Led, Nanjing 210012 , China
Abstract:
Keywords:Escherichia coli  K88 pilus antigen  K88 antiserum
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