pEGFP-N1-MeCP2上调质粒的构建及意义

目的:构建MeCP2真核表达载体并在SH-SY5Y细胞中表达。方法:采用RT-PCR、pEGFP-N1-MeCP2质粒提取、Western blot检测pEGFP-N1-MeCP2在在SH-SY5Y细胞中的表达。结果:将重组质粒pEGFP-N1-MeCP2与pEGFP-N1空载体组分别转染至SH-SY5Y细胞中,48h后利用Western Blot检测表明,转染pEGFP-N1-MeCP2的细胞在82kDa处可见一特异性的表达带,为MeCP2与GFP的融合蛋白,而在空载体组未见条带;在27KDa附近,空载体组可见条带,而转染pEGFP-N1-MeCP2的细胞未见条带,提示pEGFP-N1-MeCP2载体能够在SH-SY5Y细胞中表达。结论:构建pEGFP-N1-MeCP2上调质粒是进一步研究MeCP2蛋白功能的基础,也是研究MeCP2蛋白在帕金森病中作用机制的关键。