| POMC在不同毛色绵羊皮肤中的表达与定位 |
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| 引用本文： | 马淑慧,李亚楠,赫晓燕,王海东,杨磊,董常生.POMC在不同毛色绵羊皮肤中的表达与定位[J].中国农业科学,2015,48(9):1818-1824. |
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| 作者姓名： | 马淑慧 李亚楠 赫晓燕 王海东 杨磊 董常生 |
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| 作者单位： | 1山西农业大学动物科技学院，山西太谷 030801
2山西农业大学信息学院，山西太谷 030801 |
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| 基金项目： | 国家公益性行业（农业）科研专项（201303119）、国家自然科学基金（31302049） |
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| 摘 要： | 【目的】对不同毛色绵羊皮肤中的阿黑皮素原（proopiomelanocortin，POMC）进行定位和表达差异分析，确定POMC与毛色形成的关系，进一步丰富有关哺乳动物毛色形成机制的理论知识。【方法】选取年龄相近的雄性黑色和白色成年绵羊各3只，用取皮器分别在臀部采集皮肤组织3块，对其中一块制作石蜡切片后采用免疫组织化学法确定POMC在不同绵羊皮肤中的定位，另两块置于液氮中冻存后分别提取皮肤总RNA和总蛋白，总RNA经反转录成cDNA后，经NCBI分析比对后设计POMC特异性PCR引物，采用QRT-PCR方法检测POMC基因在mRNA水平的表达差异；总蛋白经SDS-PAGE凝胶电泳后，采用Western blotting方法加入POMC多克隆抗体检测POMC在蛋白水平的表达差异，得出的数据用SPSS19.0软件进行差异显著性分析，探讨POMC对毛色形成机制的调控作用。【结果】免疫组织化学结果显示POMC在黑色和白色绵羊皮肤中均有表达，且表达部位都位于毛囊根鞘周围和表皮的皮肤角质形成层细胞内；QRT-PCR结果显示POMC在黑色绵羊皮肤中mRNA的相对表达量为2.5004±0.2577**，而在白色绵羊皮肤中POMC的mRNA的相对表达量为1.0032±0.0350，黑色绵羊皮肤中POMC的mRNA的相对表达量为白色绵羊皮肤的2.5倍，二者表达差异极显著（P＜0.01）；Western boltting结果显示黑色绵羊皮肤POMC蛋白水平相对表达量为1.5253±0.0426*，而白色皮肤中POMC蛋白水平相对表达量为1.0005±0.0180，黑色皮肤POMC蛋白表达量是白色皮肤的1.55倍（P＜0.05），两者差异显著。【结论】试验表明POMC可在黑色和白色绵羊皮肤中正常表达，且其表达位置一致，但POMC在不同毛色绵羊皮肤组织中mRNA和蛋白的表达水平存在一定的差异，表明POMC的表达量变化会在一定程度上影响毛色的生成。
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| 关 键 词： | 绵羊 POMC Westernblotting 免疫组织化学 |
| 收稿时间： | 2014-07-15 |
POMC Expression and Localization in Sheep Skin with Different Coat Color |
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| MA Shu-hui,LI Ya-nan,HE Xiao-yan,WANG Hai-dong,YANG Lei,DONG Chang-sheng.POMC Expression and Localization in Sheep Skin with Different Coat Color[J].Scientia Agricultura Sinica,2015,48(9):1818-1824. |
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| Authors: | MA Shu-hui LI Ya-nan HE Xiao-yan WANG Hai-dong YANG Lei DONG Chang-sheng |
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| Institution: | 1College of Animal Science and Veterinary Medicine, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, Shanxi
2College of Information, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, Shanxi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | sheep POMC Western blotting immunohistochemistry |
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