| 野油菜黄单胞菌葡萄糖激酶基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 杨正久,钱静,张连英,董红梅,陆光涛.野油菜黄单胞菌葡萄糖激酶基因的克隆与表达[J].江苏农业科学,2013,41(6). |
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| 作者姓名： | 杨正久 钱静 张连英 董红梅 陆光涛 |
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| 作者单位： | 1. 遵义医药高等专科学校医学技术系,贵州遵义,563000
2. 广西大学生命科学与技术学院,广西南宁,530005 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目，国家自然科学基金面上项目 |
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| 摘 要： | 葡萄糖激酶催化葡萄糖磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸,是糖酵解的第一步反应,在野油菜黄单胞菌(Xcc)利用碳源代谢及其致病性中起重要作用.为了初步鉴定Xcc葡萄糖激酶基因功能,为研究其利用碳源相关代谢及致病性提供理论依据,以pQE30为表达载体,采用常规PCR技术对野油菜黄单胞菌Xcc8004基因组上注释为葡萄糖激酶的3个基因(XC_1166、XC_1223和XC_1976)进行了克隆与表达,该3个基因在大肠杆菌JM109中有较高表达量,经Ni2+金属层析柱纯化后分别得到带有3个His的融合蛋白XC_1166-His6、XC_1223-His6和XC_1976-His6,分析表明仅XC_1976的表达产物具有葡萄糖激酶活性,为Xcc8004葡萄糖激酶基因,经测定XC_1976-His6的最适反应温度为45℃,最适pH值为7.1,最适反应条件下比活力为(380.6±1.123) U/mg.
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| 关 键 词： | 野油菜黄单胞菌 葡萄糖激酶 克隆 表达 |
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