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榅桲4CL基因的克隆与生物信息学分析
引用本文:杨波,车玉红,郭春苗,木巴热克·阿尤普,吴津蓉,杜鹃.榅桲4CL基因的克隆与生物信息学分析[J].新疆农业科学,2021,58(6):1055-1063.
作者姓名:杨波  车玉红  郭春苗  木巴热克·阿尤普  吴津蓉  杜鹃
作者单位:1.新疆农业科学院园艺作物研究所,乌鲁木齐 830091; 2.新疆农业职业技术学院,新疆昌吉 831100
基金项目:新疆维吾尔自治区自然科学基金(2018D01A45)
摘    要:【目的】克隆榅桲果肉(Cydonia oblonga Mill)中4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate CoA ligase,4CL)基因,研究其序列特征,为该基因在榅桲果实发育过程中的作用和功能奠定基础。【方法】以榅桲果肉为试材,基于GenBank报道的近缘物种4CL基因cDNA序列,应用Primer Premier 5.0软件设计PCR扩增引物。提取榅桲总RNA,经反转录后合成cDNA,应用RT-PCR方法成功扩增出4CL基因片段并克隆到pMD18-T载体。通过DNAstar软件进行同源序列比对,ClustalX结合MEGA4.1软件构建系统进化树,采用Protparam在线程序分析蛋白质的理化性质,用DNAstar的Protean程序预测二级结构。【结果】榅桲4CL基因其开放阅读框(ORF)序列为1 710 bp,编码570个氨基酸,蛋白分子质量为68.4 kD,与其他物种序列同源性最高达91.99%,进化关系上与水密桃较近;榅桲4CL蛋白为亲水性蛋白,二级结构中以无规卷曲(Random coil)为主,占比达到44.27%。【结论】获得了榅桲4CL基因全长编码区序列,探明了该序列的结构特征。

关 键 词:榅桲  4CL  克隆  序列分析  
收稿时间:2020-09-03

Cloning and bioinformation analysis of 4CL gene in Cydonia oblonga Mill
YANG Bo,CHE Yuhong,GUO Chunmiao,Mubareke·Ayoupu,WU Jingrong,DU Juan.Cloning and bioinformation analysis of 4CL gene in Cydonia oblonga Mill[J].Xinjiang Agricultural Sciences,2021,58(6):1055-1063.
Authors:YANG Bo  CHE Yuhong  GUO Chunmiao  Mubareke·Ayoupu  WU Jingrong  DU Juan
Institution:1. Institute of Horticulture,Xinjiang Academy of Agricultural Sciences; Urumqi 830091, China; 2. Xinjiang Agricultural Professional Technology College; Changji Xinjiang 831100,China
Abstract:
Keywords:Cydonia oblonga Mill  4CL  clone  sequence analysis  
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